无血清细胞冻存液 Serum-free Cell Freez

本品含有DMSO、葡萄糖等各种细胞营养成分,适用于各种常见和肿瘤动物细胞株,冻存的细胞可在-80℃长期保存,无需经过程序性降温过程。

本品的配方成分明确,不含有动物来源的蛋白,不含血清,可减少各类细菌、病毒和支原体等污染,保证冻存细胞的安全,且适合无血清培养细胞和蛋白表达细胞。

使用方法

细胞冻存步骤

1、 常规方法收集对数期的贴壁细胞或者悬浮细胞于试管中。

2、 根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存的细胞数。

3、 将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中,1000rmp离心5分钟,收集培养细胞沉淀,彻底弃去离心管中的上清液。

4、 加入适量的本冻存液于离心管中,使细胞浓度约为5*105-1*107/ml。轻柔地混匀细胞,制成细胞混合液。

5、 将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中,建议每管1ml或1.5ml。

6、 直接将分装好的细胞冻存管置于-80℃超低温冰箱中,可长期保存。

7、 若需液氮长期保存,需先置于-80℃至少一天后方可转至液氮罐中。

冻存细胞复苏步骤

1、 从冰箱中取出冻存的细胞,立即置于37℃水浴槽中快速解冻。

2、 待冻存管中的细胞混合液完全融化后,立即加入1ml细胞培养基于冻存管中与细胞混合,将其中的混合液移至含有约5ml该细胞培养基的离心管中,1000rmp离心5分钟,收集冻存细胞沉淀,移去上清液（注意勿将细胞沉淀倒掉）。

3、 加入适量的新鲜培养基,使用移液管缓缓加入细胞沉淀中,轻柔混匀,将混匀好的细胞移至事先准备好的培养容器中。

4、 镜检观察,待细胞状态恢复后可进行其他研究或者培养处理。

保存条件

常温运输,短期4℃保存,有效期一年；长期-20℃保存,有效期两年。

注意事项

1、 本品可用于常规细胞的冻存,-80℃可长期保存,细胞的存活率在90-98%。

2、 使用本产品加入细胞后,应尽量减少室温存放时间,并尽快移至-80℃保存。

3、 对于干细胞（ES细胞）、原代等细胞冻存时,建议使用前,先对所要冻存的细胞进行至少1周以上的试验性冻存培养,确认效果后再正式大批量冻存。

4、 本品含有10%DMSO,部分对DMSO敏感的细胞,建议也许先进行预实验,确认效果后再大量正式使用。

5、 对于没有保种的新的细胞类型,使用本品时建议冻存部分细胞于含血清的冻存液中,以避免可能的意外情况。

6、 取用冻存液均要在超净工作台内无菌操作 。

7、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。