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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Agarose L.M.P
- CAS号:
9012-36-6
- 保质期:
3年
- 供应商:
合肥博美
- 保存条件:
18~26℃
- 规格:
5g /25g
| 规格: | 5g | 产品价格: | ¥256.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 25g | 产品价格: | ¥1040.0 |
Agarose L.M.P
低溶点琼脂糖 (低熔点琼脂糖)
说明:熔点65℃ 适用于琼脂糖凝胶电泳 Store:18~26℃
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文献和实验,到细胞形成克隆时终止培养。 基本步骤: (1)取对数生长期细胞,用0.25%胰蛋白酶消化并轻轻吹打,使之成为单细胞,作活细胞计数,用含20%胎牛血清的DMEM培养液调整细胞密度至1×106细胞/L。然后根据实验要求作梯度倍数稀释。 (2)用蒸馏水分别制备出1.2%和0.7%两个浓度的低溶点琼脂糖液,高压灭菌后,维持在40℃中不会凝固。 (3)按1:1比例使1.2%的琼脂糖和2×DMEM培养基(含有2×抗生素和20%的小牛血清)混合后,取3mL混合液注入直径6cm平皿中(10cm平皿加
以下事项: 为方便提取,应尽量缩小凝胶切割面积 防止在凝胶可视化过程中对核酸的损害 如果使用可紫外激发的染料(例如溴化乙锭)进行可视化,请尽量减少样品暴露于辐射的时间,对激发使用更长的紫外线波长(例如 360 nm,而不是 254 nm),并选择透射上的落射照明。可以被较低能量蓝光激发的荧光染料(如SYBR染料)是样品可视化的更好备选方案,因为它们可以减少样品对辐射的损害。 由于琼脂糖和聚丙烯酰胺不同,两种凝胶基质的纯化策略通常不同,总结如下: ①琼脂糖凝胶纯化 从凝胶中切割出目标
胶块。 4.称量胶块重量,计算胶块体积(1mg =1μl)。 5.向胶块中加入胶块融化液DR-I Buffer, DR-I Buffer 的加量如下表: 凝胶浓度 DR-I Buffer 使用量 1.0% 3个凝胶体积量 1.0-1.5% 4个凝胶体积量 1.5-2.0% 5个凝胶体积量 6.均匀混合后75℃加热融化胶块(低溶点琼脂糖凝胶只需在45℃加热
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