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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
详询
- 保质期:
详询
- 库存:
50
- 供应商:
广州市左克生物
- 规格:
200T
产品简介:
品牌:MultiSciences/联科生物
货号:70-GAS006
产品名称:FIX&PERM Kit固定破膜剂
请根据用量选择合适的规格:
- 50T - GAS003
- 100T - GAS005
- 200T - GAS006
- 500T - GAS007
- 1000T - GAS008
产品简介
FIX & PERM试剂盒可对细胞悬液进行固定(MEDIUM A)和破膜(MEDIUM B),使抗体顺利进入胞内,并使细胞形态仍然保存完整。本产品可减少非特异性染色,并可同时加入破膜剂和荧光标记抗体进行染色。
产品特点
- 破膜后细胞分群保持完整;
- 溶血、破膜、染色一步完成,节约成本,操作简便;
- 保持抗体的特异性、灵敏度以及可重复性。
使用方法
- 在 5 mL 的流式管中加入 100 μL 含 1 × 106 个细胞的悬液以及荧光标记的表面抗体和/或相应的同型对照,按照抗体说明书进行孵育。
- 加入 100 μL MEDIUM A,室温孵育 15 分钟。
- 加入 3 mL 流式染色缓冲液(目录号 S1001)或含 5% FBS 的 PBS ,300 - 350 ×g 离心5 分钟,弃上清, 涡旋 振荡,使残留的液体重悬细胞沉淀。
- 加入 100 μL MEDIUM B 和推荐体积的胞内抗体和/或相应的同型对照。5. 涡旋振荡 1 - 2 秒, 按照抗体说明书进行孵育。
- 加入 3 mL 流式染色缓冲液或含 5% FBS 的 PBS ,300 - 350 × g 离心 5 分钟,弃上清。7. 加入 0.5 mL 流式染色缓冲液或含 5% FBS 的 PBS,上机检测。如当天不能检测,则加入0.5mL 0.1% 福尔马林, 2 – 8 ℃ 避光保存,在 24 小时内检测。
注意事项
- 请在使用本产品前仔细阅读说明书。 本产品仅用于科研,不可用于诊断。
- 为了您的安全和健康, 请穿戴实验防护服、手套、口罩等必要的防护装备。
- 大部分商用抗体都能与本产品兼容。但某些抗原决定簇对固定剂敏感,需要根据经验优化固定时间。
- 该试剂开盖后请尽快用完,若不能及时用完,可2~8℃暂存,如试剂产生沉淀或变色,请勿使用。
- 更多流式相关产品敬请关注联科生物网站或来电咨询。
结果示例

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文献和实验能和 FcγR Ⅲ/Ⅱ结合,封闭非特异性染色,使阴性细胞的背景荧光降至未标记细胞的水平。加入 0.5-1μg 纯的抗小鼠 CD16/32 单克隆抗体,室温孵育 10min。 对于人和大鼠,可直接使用过量的与荧光抗体相同来源和亚型的纯化 Ig 或者与目标种属相同来源血清进行阻断,或者用商业化的 Fc 受体阻断剂。 五、细胞表面抗体孵育 根据实验设计,除空白对照外,对应的单染管、全染管加入相应的抗体 5μL,混匀,4℃ 避光孵育 30min。 六、固定破膜 按照说明书稀释固定破膜液。 每管加入
公司有各自的试剂,ebioscience或者BD,看你的抗体是那个公司的,但是操作流程大致相同)2、加入Fix/Perm Buffer 250ul 后,混匀,4度孵育30分钟(公司可能推荐1ml,我一直加250ul,绝对可行)或者室温15~20分钟3、用公司配套的Perm Wash Buffer 1x的2ml洗涤1-2次,本人一直洗一次节约试剂,也没有问题4、如果有Isotype染色的,需要加Normal Rat Serum 4ul 进行blocking,混匀,室温下孵育15分钟5、如果不做Isotype
image of a whole mount from a 4 wk old virgin Protocol Spread tissue on glass slide Fix in Carnoy's fixative for 2 to 4 hours at r.t. Wash in 70 % EtOH for 15 min Change gradually to distilled water
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