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- 上海
- 2025年12月22日
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伊莱博生物科技（上海）有限公司
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恶性黑色素瘤动物模型
一、模型分类与构建方法
1. 诱导性模型（模拟环境致癌）
| 类型 | 操作要点 | 机制与特点 | 适用研究 |
|---|---|---|---|
| 紫外线诱导 | - 持续UVB照射（100-200 mJ/cm²/次，3次/周） - 品系：K14-SCF:XPA⁻/⁻小鼠 |
激活MAPK通路（BRAF突变），模拟人类日光暴露型黑色素瘤 | 环境致癌机制、预防策略 |
| 化学诱导 | - 局部涂抹DMBA（7,12-二甲基苯并蒽） - 联合TPA（佛波酯）促进肿瘤发展 |
诱导Ras突变，但病理异质性高，临床相关性弱 | 化学致癌物筛查 |
局限：造模周期长（≥20周），肿瘤潜伏期不稳定。
2. 移植性模型（主流应用）
| 类型 | 操作要点 | 转移特性 | 优势与局限 |
|---|---|---|---|
| 同种移植皮下模型 | - 细胞株：B16（C57BL/6小鼠源） - 腋窝接种1×10⁶细胞，17天成瘤 |
自发肺转移率30-50% | 成瘤率高（>95%），但侵袭性弱 |
| 同种移植转移模型 | - 尾静脉注射B16F10细胞（1×10⁶/鼠） - 14天肺转移灶形成 |
靶向肺转移（结节数>50/肺） | 标准化肺转移研究 |
| 异种移植模型（PDX） | - 重度免疫缺陷鼠（NSG）皮下植入患者肿瘤组织 - 传代保种 |
保留原发瘤异质性和药物响应 | 人源微环境模拟，但免疫缺陷限制免疫治疗研究 |
关键细节：
- B16细胞复苏后需经鼠尾胶原三维培养提升存活率
- PDX模型需定期检测基因组稳定性（STR分型）
3. 基因工程模型（机制研究核心）
| 基因操作 | 模型表现 | 分子机制 | 代表品系 |
|---|---|---|---|
| BRAFᵛ⁶⁰ᴱ过表达 | - Tyr::CreERᵀ²; BRAFᵜᵛ⁶⁰ᴱ小鼠 - 他莫昔芬诱导后4周出现原位黑色素瘤 |
MAPK通路持续激活，模拟人类BRAF突变亚型 | C57BL/6 |
| PTEN缺失 + BRAF突变 | - Tyr::CreERᵀ²; BRAFᵜᵛ⁶⁰ᴱ; PTEN⁻/⁻ - 加速侵袭和转移（8周内肺转移） |
PI3K-AKT通路协同驱动转移 | 杂交品系 |
| HRasᴳ¹²ⱽ转基因 | - MT/ret+HRasᴳ¹²ⱽ小鼠 - 皮肤结节伴真皮侵袭 |
Ras-Raf通路异常，血管生成拟态显著 | FVB/N |
注：BRAFᵛ⁶⁰ᴱ模型需配合UV照射或皮肤损伤才可诱发侵袭。
二、模型评价体系
1. 核心表型指标
| 指标 | 检测方法 | 意义 |
|---|---|---|
| 原发瘤生长 | 游标卡尺测量体积：V=0.5×长×宽² | 评估局部增殖（>500 mm³为进展期） |
| 转移灶定量 | - 肺转移：Bouin's液固定后计数黑色结节 - 全身转移：活体荧光成像（IVIS） |
转移负荷量化（>20结节为高转移） |
| 血管生成拟态 | CD31/PAS双染色：管状网络结构 | 提示侵袭性强（VM⁺者预后差） |
| 分子分型验证 | IHC检测：BRAFᵛ⁶⁰ᴱ、S100、HMB45 | 确认黑色素瘤亚型（BRAF突变型 vs NRAS突变型） |
2. 功能与机制指标
| 通路 | 关键标志物 | 检测技术 |
|---|---|---|
| MAPK通路 | p-ERK↑、BRAFᵛ⁶⁰ᴱ突变 | Western blot / ddPCR |
| 免疫微环境 | CD8⁺T细胞浸润↓、PD-L1↑ | 多色流式 / mIHC |
| 代谢重编程 | MCT1↑、LDHA↑ | 代谢组学 / ¹⁸F-FDG PET |
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，是有人因一次冷冻不彻底而发生恶变的。约有 30% ～ 50% 的恶性黑色素瘤与外界刺激有关。如果因美容的需要，应将痣一次性切除，是比较安全可靠的。冷冻结合切除，力求一次完成，切忌分次切除，切除的标本应送病理检查。 3. 色痣恶变的信息 （ 1 ）色痣体积增大，色素或深或变浅。 （ 2 ）色痣呈放射状向周围扩展。 （ 3 ）色痣无故疼痛或不适，表面有少量的渗出物。
癌症已经成为影响人类健康的重要疾病，发病率呈现逐年上升趋势，癌症研究领域中公认的缺陷之一是缺乏能够研究癌变和癌症治疗的模型系统。在过去的几十年中，抗肿瘤治疗药物的研发呈现爆炸式的增长，但是绝大多数新疗法都不能顺利通过III期临床试验，其主要原因就是缺乏合适的体内模型。我们常用的人类肿瘤细胞系或患者源性肿瘤移植到免疫缺陷小鼠体内的肿瘤动物模型，使用人类肿瘤细胞系建立的动物模型称作肿瘤细胞系异种移植模型（Cancer cell line-based xenograft , CDX），而使
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