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- 上海
- 2025年12月22日
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伊莱博生物科技（上海）有限公司
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炎性肠病动物模型
一、模型构建的核心方法
1. 化学诱导模型（操作简便、应用最广）
| 模型类型 | 诱导剂 | 操作要点 | 病理特征 | 适用研究 |
|---|---|---|---|---|
| DSS模型 | 葡聚糖硫酸钠 | - 浓度：2%~5% DSS溶液自由饮用 - 周期：5~7天（急性），3周期循环（慢性） - 品系：C57BL/6（最常用）、BALB/c、昆明小鼠 |
远端结肠黏膜溃疡、隐窝结构破坏、杯状细胞减少，模拟UC | 屏障损伤、先天免疫、药物筛选 |
| TNBS模型 | 三硝基ben磺酸 | - 溶剂：50%乙醇溶解 - 剂量：100~150 mg/kg 直肠灌注 - 周期：单次（急性），多周期（慢性） |
透壁性炎症、肉芽肿形成，模拟CD | Th1免疫应答、纤维化机制研究 |
| 恶唑酮模型 | 噻唑酮 | - 致敏：0.2%溶液涂抹皮肤 - 激发：1%溶液直肠灌注 - 品系：BALB/c小鼠 |
Th2型免疫反应（IL-13↑），黏膜及黏膜下层淋巴细胞浸润 | UC免疫机制、Th2通路靶点验证 |
| 乙酸模型 | 冰乙酸 | - 浓度：3%~5% - 操作：直肠灌注 - 动物：大鼠、兔 |
化学性黏膜损伤，急性炎症为主 | 黏膜修复药物初筛 |
注：
- DSS慢性模型改良：采用"5天DSS+7天清水"循环×3轮，诱导结肠癌变（AOM/DSS法）
- TNBS溶剂优化：40%~50%乙醇可增强黏膜渗透，但>60%易致坏死
2. 基因工程模型（机制明确、重复性好）
| 基因类型 | 模型表现 | 优势与局限 | 关键品系 |
|---|---|---|---|
| 单基因敲除 | - IL-10⁻/⁻：3月龄后自发结肠炎（CD样） - Muc2⁻/⁻：杯状细胞缺失，腹泻便血 |
症状较轻，SPF环境下发病延迟 | C57BL/6、129Sv |
| 双基因敲除 | - Muc2/IL-10⁻/⁻：4周龄即腹泻便血，隐窝脓肿、TNF-α↑↑ | 发病早、症状重，模拟儿童IBD | 杂交品系（需定制） |
| 转基因模型 | - HLA-B27：肠道炎症伴关节炎 - STAT-4：Th1极化 |
多器官受累，机制复杂 | F344大鼠、C3H/HeJ小鼠 |
注：基因模型需配合无菌环境（避免微生物干扰）和特定年龄（如IL-10⁻/⁻需>12周）。
3. 免疫诱导模型（贴近人类免疫病理）
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T细胞移植模型
- 操作：将CD4⁺CD45RBʰⁱᵍʰ T细胞移植至Rag1⁻/⁻或SCID小鼠
- 特点：
- 缺乏Treg细胞致免疫失衡，4~8周后结肠炎
- 透壁性炎症、肉芽肿形成（模拟CD）
- 适用：T细胞调控机制、微生物-免疫互作研究
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细菌诱导模型
- 方法：口服鼠伤寒sha门氏菌（10⁹ CFU/mL）或胆汁螺杆菌
- 机制：病原菌破坏屏障，激活TLR通路
- 局限：个体差异大，标准化困难
4. 并发症与特殊模型
| 模型目标 | 构建方法 | 评价重点 |
|---|---|---|
| 肠纤维化 | DSS/TNBS慢性模型（≥8周） | 胶原沉积（Masson染色）、α-SMA⁺肌成纤维细胞增殖 |
| IBD相关癌变 | AOM（10 mg/kg）注射 + DSS循环 | 结肠肿瘤数量、Ki-67指数、β-catenin核转位 |
| 跨物种模型 | - 猕猴：0.25% DSS饮用10天 - 斑马鱼：DSS浸泡（0.5~1 mg/mL） |
猕猴病理接近人类；斑马鱼适合高通量筛选 |
二、模型评价体系
1. 核心表型指标
| 指标类型 | 检测方法 | 阳性标准 |
|---|---|---|
| 疾病活动指数（DAI） | 体重下降（0~4分）+ 便血（0~4分）+ 粪便性状（0~4分） | 总分≥4分（急性模型） |
| 肠道通透性 | FITC-葡聚糖灌胃，2小时后血清荧光值 | 较对照组升高≥2倍 |
| 组织病理评分 | - 炎症深度（0~3分） - 隐窝结构（0~3分） - 杯状细胞丢失（0~3分） |
总分≥5分（H&E染色） |
示例：DSS模型典型病理
- HE染色：隐窝脓肿（黑色箭头）、黏膜溃疡（白色箭头）
- 免疫组化：ZO-1/Occludin表达↓（屏障破坏）
2. 分子与免疫指标
| 通路 | 关键标志物 | 检测技术 |
|---|---|---|
| 炎症因子 | TNF-α↑、IL-1β↑、IL-6↑（急性）；IL-17↑（慢性） | ELISA / 多重液相芯片 |
| 肠屏障功能 | Occludin↓、Claudin-2↑、MUC2↓ | 免疫荧光 / Western blot |
| 菌群紊乱 | 拟杆菌门/厚壁菌门比值↑、短链脂肪酸（SCFA）↓ | 16S rRNA测序 / GC-MS |
3. 功能学评价
- 肠道动力：炭末推进率（<60%提示传输延迟）
- 结肠长度：慢性炎症致缩短（DSS模型缩短≥20%）
- 影像学：微型CT评估肠壁增厚、狭窄
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