体内DNA及siRNA专用转染试剂

产品介绍    

本公司生产的体内DNA及siRNA专用转染试剂是一款体内专用型基因转染试剂，可通过尾静脉注射的方式将基因传送至肿瘤部位。与其它体内转染试剂相比，具有操作简便、体内毒性低、稳定性好、体内循环时间长、靶向性好等优点。

应用范围    

该转染试剂可适用于众多动物肿瘤模型。可携带荧光标记基因、治疗基因等到达肿瘤部位，并在肿瘤部位蓄积和表达。特别适用于各种常规肿瘤模型如HeLa、B16F10、MCF-7、 MDA-MB-231和A549等，均可得到较高的转染效率，且重复性好。

使用方法   

体内转染方法

以体重为20g的荷瘤鼠为例，请参考下表的转染规模调整，步骤如下:

1、试剂准备: 按照下表用量首先取20µL转染试剂放置于样品管中。

2、复合物制备: 取40µL的质粒DNA(DNA浓度为0.5µg/µL) 或siRNA(1.5nmol)与上述转染试剂进行复合。

3、室温静置20分钟。

4、补加葡萄糖注射液: 取140µL的葡萄糖注射液加入到上述复合物溶液中。

5、通过尾静脉注射的方式，注射于鼠体内，24-48小时后检测基因在肿瘤部位的蓄积或表达。                  

体内转染条件的优化

可通过改变肿瘤体积的大小、 基因的用量和浓度以及转染试剂浓度对体内转染进行优化。保证肿瘤体积在50mm3~200mm3最佳，转染试剂 (µL): DNA(µg)可以在2:1和0.5:1之间调整；转染试剂(µL): siRNA(nmol)可以在10:1和20:1之间调整。根据小鼠体重的不同，葡萄糖注射液的补加体积可以在推荐量±30µL之间调节。瘤内基因蓄积建议在注射后24小时检测，瘤内基因表达建议在注射后48小时检测。

                不同体重鼠的体内转染试剂的用量

鼠体重	建议瘤体积	葡萄糖注射液 稀释后终体积	DNA推荐用量		siRNA推荐用量
			试剂用量	DNA	试剂用量	siRNA
15g	100mm3	150µL	15µL	15µg	15µL	1.2nmol
20g	100mm3	200µL	20µL	20µg	20µL	1.5nmol
25g	100mm3	250µL	25µL	25µg	25µL	2.0nmol
30g	100mm3	300µL	30µL	30µg	30µL	2.4nmol

 

运输保存   

常温运输，2-8℃可保存一年。

注意事项   

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。