功能性腹泻动物模型

一、模型构建的核心方法

1. 单因素造模法

• 化学诱导法
  • 高乳糖饲料：Wistar大鼠饲喂乳糖替代淀粉的饲料（酪蛋白18%、乳糖58.8%、蔗糖10%等），持续14天诱导渗透性腹泻，模拟脾虚水湿内停证。该模型腹泻指数显著升高（稀便率>75%），伴体重下降、毛发枯槁。
  • dian乙酰胺灌胃：0.1%dian乙酰胺溶液灌胃6天，破坏肠道黏膜屏障，引发慢性腹泻，适用于腹泻型肠易激综合征（IBS-D）研究。
• 药物刺激法
  • 番泻叶/大黄煎剂：大鼠灌胃生药煎液（1 g/mL），通过刺激肠蠕动致泻，但模型稳定性较差。

2. 复合因素造模法（主流方法）

• 病证结合模型（脾虚证）
  • 高乳糖饲料 + 水环境小平台站立：
    • 操作：Wistar大鼠喂食高乳糖饲料，每日置于水深1.5 cm的站立箱中14小时（18:00-次日8:00），持续14天。
    • 机制：饮食不节（乳糖致泻）叠加劳倦过度（站立应激），模拟脾虚失运、水谷不化病机。
    • 症状：稀便率>80%、体重减轻30%、活动减少（旷场实验中央格停留时间延长）。
  • 夹尾应激 + 高脂饮食：
    • 操作：SD大鼠尾部夹伤（30 min/次，2次/日）联合高脂饲料喂养3周，诱导肝郁脾虚型腹泻，伴焦虑行为（糖水消耗减少）。

3. 神经-免疫调控模型

• 母婴分离 + 慢性束缚：
  • 新生大鼠与母鼠分离3小时/日（出生后2-21天），成年后追加束缚应激（1小时/日），导致肠道菌群紊乱、5-HT分泌异常，粪便含水量>15%。

二、模型的评价体系

1. 核心腹泻指标

2. 中医证候评价

• 脾虚证特征：
  • 行为学：体重增长率下降>20%、摄食量减少30%、旷场实验活动距离缩短50%。
  • 分子标志物：
    • 结肠黏膜水通道蛋白（AQP4、AQP8）表达下调→水分吸收障碍；
    • 血清D-木糖吸收率降低（提示小肠吸收功能障碍）。

3. 肠道功能与病理

• 胃肠动力学：
  • 小肠推进率：炭末灌胃30分钟后，推进距离/小肠全长 × 100%（模型组常<60%，正常>80%）。
• 组织病理学：
  • 结肠黏膜微绒毛稀疏、杯状细胞减少，电镜见紧密连接蛋白ZO-1表达下调。