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1000
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北京博蕾德生物科技有限公司
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100μL
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文献和实验Anti-GFP/BrdU In Situ Immunostaining
Materials 24 well dishes Millicell 0.4 µm inserts (Millipore PICM01250) - coated with fibronectin Culture medium PBS Fixative: 4% paraformaldehyde in PBS (pH 7.6) Rabbit anti-GFP (Molecular Probes, A-11122) FITC-goat anti-rabbit
对照。 二、注意事项 1、荧光染色后一般在 1h 内完成观察,或于 4℃ 保存 4h ,时间过长,可能会使荧光提前衰退。 2、每次试验均需设置以下三种对照: (1) 阳性对照:阳性血清+荧光标记物; (2)阴性对照:阴性血清+荧光标记物; (3)荧光标记物对照:PBS +荧光标记物。 三、免疫荧光双标的经验之谈 1、选取一抗时,要求来源于两种不同的动物,我用的是来源于家兔和大鼠的抗体,二抗则是不同荧光信号标记的,我用的是 donkey anti-rabbit-FITC(绿)和donkey anti
T-cell dependent antigen specific in situ staining (Pe)
6- Wash twice in TBS-T. 7- counterstain with rabbit anti B-Pe 1:2000 (0.5 µg/ml Cortex Biochem). You may add 1% mouse serum to the anti-Pe antibodies, unless you plan to use mouse monoclonal further (see below). 8- wash twice in TBS-T. 9- block
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