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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
CIHGM-1
- 库存:
100
- 细胞类型:
系膜细胞(Mesangial cell)
- 组织来源:
肾(Kidney)
- 物种来源:
人源(Homo sapiens)
- 生长状态:
贴壁生长(Adherent)
- 规格:
T25/冻存管
| 细胞名称 | 永生化肾小球系膜细胞系 |
| 英文名称 | CIHGM-1 |
| 规格 | T25/冻存管 |
| 货号 | CTCC-001-0833 |
| 种属 | 人源(Homo sapiens) |
| 组织来源 | 肾(Kidney) |
| 疾病 | 未知(Unknown) |
| 性别 | 男(Male) |
| 年龄 | 未知(Unknow) |
| 培养体系 | 该细胞系培养所用基本培养基为 RPMI1640,配置完全培养基时需加入 10%FBS,1%ITS,1%Anti-Anti。 |
| 细胞形态 | 系膜细胞(Mesangial cell) |
| 生长特性 | 贴壁生长(Adherent) |
培养瓶中细胞操作步骤
对于贴壁培养的细胞,寄送前,我们会将培养基充满整个培养瓶,以减少产品运输过程中贴壁细胞的脱落。
1. 收到细胞产品后,请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒置显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。因在运输过程中存在颠簸,且有些细胞对温度变化也很敏感,可能存在一些细胞脱落漂浮的情况,这些细胞仍是活细胞,请勿丢弃,可离心富集后传代使用。
2. 对于贴壁的细胞,在生物安全柜环境中,用真空泵去除培养瓶中的多余培养基,至剩余5-8mL左右,随后将细胞置于含有5%CO的37℃恒温 培养箱中培养,拧松瓶盖。如果细胞已经长满培养瓶请立即传代。
3. 对于悬浮的细胞,在生物安全柜环境中,转移培养瓶中的细胞至离心管中,离心200×g / 5 - 10 min,去除上清后,用5 mL培养基吹散细胞,转移至新的培养瓶中,随后置于含有5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。
冻存细胞操作步骤
注意:为保存细胞的高存活率,请收到产品后,立即解冻培养。
1.将冻存管置于37℃ 水浴中来回晃动,迅速解冻。为避免污染,确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速,大约2分钟。
2. 一旦冻存管中液体融化后,立即取出,采用 70%酒精喷拭冻存管表面。从此步开始,后续操作须在生物安全柜中完成。
3.将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中, 离心200×g / 5 - 10 min,用真空泵去除含有冻存液的上清。
4. 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率,请将培养基在37℃水浴预热后使用。
5. 将细胞置于含有5%CO2 的37℃恒温培养箱中培养。
贴壁细胞传代培养
1. 吸取并弃掉培养瓶中培养基, 加入PBS洗涤一次。
2. 加入 1.0 mL 0.25(w/v)Trypsin-0.53mM EDTA溶液,并置于37℃培养箱中孵育,直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3至5分钟(此处为12.5 cm^2 培养瓶所用体积,可根据实际情况增减用量)。
3. 加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶,并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落,并使细胞分散。
4. 离心200x g/5 min,去除上清后,取适量的培养基将细胞重悬,取适量悬液置于新的培养瓶中,并加入新鲜细胞完全培养基至总体积为4mL。
5. 将细胞置于含有5%CO2的37℃恒温培养箱中培养。
传代比例:建议 1:2 至 1:3(以培养瓶底面积计算)
培养基换液: 每隔 2 至 3 天。
细胞冻存液
细胞冻存液,请使用产品: Cryo Frozen Medium(Cat#CTCC-002-002)离心收集细胞后,加入适量冻存液(每管细胞冻存量达到10的6次方),将冻存管放入冻存盒置于负80冰箱,24h后将冻存管转入液氮长期保存。
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文献和实验足细胞来源: 丁香园网友yulinlong的观点为: 很多细胞中心就有卖的,或者有的公司可以代理ATCC公司的就可以。 有的文献用的永生化细胞系是他们自己建的系或者别人建系赠予的,你也可以考虑向国内或者国外去请求馈赠。有的会给的。 丁香园网友wenyueqiang的观点为: 美国爱因斯坦大学的PETER MUNDEL有 足细胞
腺病毒可以在293A细胞中进行转录,表达并可进行包装复制出大量高滴度病毒。293T是一种逆转录包装表达细胞,我做过也可进行表达,但还没有具体鉴定表达后的病毒是否可用。293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5)DNA的永生化细胞,表达转染的腺病毒5的基因。细胞来源都是人肧肾上皮细胞,293T细胞表达E1A蛋白,SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。293FT细胞能制造高滴度的慢病毒。293A细胞来源于人肾纤维母细胞,组成性表达E1A 和E1B 蛋白
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