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文献和实验碱性磷酸酶染色操作
1. 取40ul染色试剂A加入到 1ml反应缓冲液中，混匀后，再加入40ul染色试剂B 混匀，即配成反应工作液(现配现用)。
2. 移除待染色孔内培养基，每孔加入2ml PBS静置1min后移除，洗涤2次；
3. 每孔加入500μl固定液，37℃（或室温）固定30min；
4. 移除固定液，每孔加洗涤液500μl，洗涤2次；
5. 加入第一步现配的反应工作液500μl，37℃（或室温）染色30min；
6. 每孔加入洗涤液500μl，洗涤2次，显微镜下观察。
碱性磷酸酶染色注意事项：
1. 需避光保存。
2. 请于保质期内使用。
3. 为了您的健康，请在实验过程中穿上实验服，带好手套。
高。如果有相同的抗原决定簇时，则会有交叉反应。方法成熟，使用广泛的还是经典的组织化学方法。下面以碱性磷酸酶的显示方法来学习经典酶组织化学的理论及操作。经典酶组织化学不是显示酶本身，常采用的方法是：在一定条件下，使细胞中的酶作用于酶的底物，使其产物在原地进行捕捉、沉淀转化为有色产物。碱性磷酸酶（AKP）的显示方法最早由Gomeri（1939）提出，现在这种方法称为Gomeri法。碱性磷酸酶是指磷酸单酯酶Ⅰ，它能在pH8.6~10.0的最适条件下分解磷酸单酯，对于与磷酸相接的醇基没有特异性，Gomeri法
Gomori染色是用于检测细胞中骨型碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase BALP)的一种染色法，具体内容如下： 一、主要试剂准备：PBS、丙酮（或甲醛、95乙醇）、3%β-甘油酸钠、2%巴比妥钠、2�Cl2、2%MgSO4、2%硝酸钴、1%硫化铵（纯的硫化铵也为液体，且由于其有强烈的刺激性味道，建议现配现用） 二、实验步骤： 1、将无菌玻片放在细胞的培养皿中
在血及骨髓涂片中的成熟中性粒细胞碱性磷酸酶染色呈阳性反应，中性晚幼粒偶呈弱阳性，但因实验室条件不同参考值常有差异。一般认为阳性率平均为10%～30%，积分在50分以下。 【临床意义】 中性粒细胞碱性磷酸酶活性增高可见于：严重化脓性感染、急淋、再生障碍性贫血、类白血病反应、多发性骨髓瘤、浆细胞白血病、恶性淋巴瘤及骨髓纤维化等。 中性粒细胞碱性磷酸酶活性减低可见于：病毒感染、急粒、慢粒、粒细胞缺乏症、恶性组织细胞增生症、传单、恶性贫血及阵发
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