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北京百泰派克生物科技有限公司
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石蜡包埋的组织块该怎么保存
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石蜡包埋的组织块该怎么保存
石蜡包埋的组织块是病理学和生物学研究中常用的样本形式,其保存质量直接影响后续切片、染色及分子检测结果的可靠性。为确保组织结构的完整性和生物分子的稳定性,石蜡包埋的组织块需要在特定条件下长期保存。首先,环境温湿度是核心影响因素,推荐将石蜡包埋的组织块置于干燥、避光且温度稳定的环境中,通常选择室温(15-25°C)或4°C冷藏保存。若需更长期保存,可考虑-20°C或-80°C低温条件,但需注意避免反复冻融导致石蜡开裂或组织损伤。其次,包装材料的选择至关重要,组织块应密封于防潮、防氧化的容器中,如带硅胶干燥剂的塑料盒或真空密封袋,以减少湿气和空气接触。此外,标记和记录系统需规范,建议使用耐溶剂和低温的标签,并建立电子数据库存档样本信息,包括包埋日期、组织来源及处理条件等。对于珍贵或高频使用的样本,可考虑分装保存以降低反复取用的风险。具体费用需要根据实验需求和样品情况来确定。
在保存过程中,石蜡包埋的组织块可能面临石蜡老化、组织脱水或微生物污染等问题。石蜡老化会导致组织块变脆,影响切片质量,因此需定期检查保存状态,必要时重新包埋。对于涉及分子生物学研究的样本,还需注意避免RNA或DNA降解,可在包埋前进行特殊固定处理(如RNAlater浸泡),并在保存时添加干燥剂以维持低湿度环境。实验室中常见的错误包括将石蜡包埋的组织块直接暴露于潮湿环境或阳光直射下,这可能导致石蜡变形或组织腐败。此外,不同组织类型(如脂肪组织或致密结缔组织)对保存条件的敏感性差异较大,需针对性调整方案。
对于大规模样本库,自动化存储系统可提高石蜡包埋的组织块保存效率。这类系统通常配备环境监控模块,实时调节温湿度,并通过条形码或RFID技术实现样本追踪。若需国际运输或共享样本,应遵循IATA规范,使用防震包装并附上完整的保存条件说明。在长期保存中,建议每5-10年对石蜡包埋的组织块进行质量抽检,通过HE染色或PCR验证样本可用性。
常见问题:
Q1. 石蜡包埋的组织块在低温保存时出现裂纹,如何避免?
A:裂纹通常由石蜡与组织热膨胀系数差异导致。建议在降温时采用梯度冷冻法(如先4°C平衡24小时,再转入-20°C),并使用柔性包埋蜡(如Paraplast X-TRA)以减少应力。
Q2. 长期保存的石蜡包埋组织块能否用于免疫组化检测?
A:可行性取决于保存条件和抗原性质。建议先进行抗原修复优化(如高压热修复或酶消化),并设立阳性对照。若保存超过10年,需验证抗体结合效率。
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文献和实验患者活检或手术标本的研究对于阐明疾病尤其肿瘤的发病机制、指导治疗方案来说非常重要。但是活体组织一旦离体,血氧供应停止,就会产生一系列生物化学和组织形态学的改变,直至发生自溶,干缩,腐败,核酸和蛋白也会迅速降解,因此需要及时固定。福尔马林固定、石蜡包埋 (Formalin-Fixed and Parrffin-Embedded, FFPE) 技术能够在组织离体后最大程度地保存其原有的形态学结构及生物学信息,成为肿瘤研究领域中疾病诊断和科学研究中非常常见的生物学材料。 在分子病理学高速发展的今天
悬液。 对石蜡包埋组织应先切成若干 40~50μm 厚的蜡片,经二甲苯脱蜡至水后,再用前述方法制备单细胞悬液。 单细胞悬液的细胞数不少于 107个/mL。 二、流式细胞术实验操作大致分为以下五个步骤 取材:取手术或活检组织必须具有代表性,如取手术肿瘤组织,必须取肿瘤细胞生长旺盛部位;组织等标本必须在取材后保持样本的新鲜;一般在室温1个小时内处理好样本或及时用固定剂或低温对组织进行保存。 对细胞的待测生物化学成分进行荧光染色。 按照厂家提供的软件程序对样本进行获取、检测和存储。 依照软件提供的程序
组织化学与免疫组织化学染色标本的石蜡包埋组织化学与免疫组织化学染色标本常用石蜡切片和冰冻切片。对于柔软的胚胎组织或脑也可用琼脂包埋后振动切片机切片。用于免疫组织化学染色的石蜡切片(paraffin secdon)与常规HE染色的石蜡切片基本 制片过程相同。石蜡切片的优点是组织结构保存良好,结构清晰,能连续切片,抗原定位准确,更适合回顾性研究。固定好的组织在切片前要经石蜡包埋封存,而石蜡与水不相溶。故需用乙醇脱去组织内多余水分。脱去水分后组织中的乙醇仍与石蜡不相溶,故还需用二甲苯替换乙醇
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