吲哚乙酸氧化酶(IAAO)试剂盒产品图

吲哚乙酸氧化酶(IAAO)试剂盒

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  • ￥570
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  • WS6310F
  • 国内
  • 2026年07月28日
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    • 英文名：

      Indoleacetic Acid Oxidase (IAAO) Kit

    • CAS号：

      WS6310F

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      24T

    本试剂盒仅供科研使用
    吲哚乙酸氧化酶（IAAO）测定试剂盒说明书
    （货号：WS6310F 分光法 24 样）
    一、产品简介：
    吲哚乙酸氧化酶（IAAO）是一种调节植物体内 IAA 水平重要作用的酶, 其活力的大小, 对调节
    体内 IAA 的水平起着重要的作用，它氧化分解 IAA 而使其失活，调节 IAA 水平以保持植物正常生
    长发育, 从而影响着植物体的生长速度。
    吲哚乙酸氧化酶（IAAO）活性的大小可以用其破坏 IAA 的速度表示。反应体系中加入定量的
    IAA 在 IAAO 作用下形成吲哚醛，使体系中 IAA 含量减少，剩余的 IAA 在无机酸存在下与 FeCl3 作用
    生生成红色螯合物，可在530 nm 处比色法测定，根据空白与酶液中IAA含量的差值，即可计算出IAAO
    活性的大小。
    二、试剂盒组成和配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    提取液
    液体 70mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂一
    液体 5mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂二
    液体 5mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂三
    液体 5mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂四
    液体 1mL×1 支
    4℃保存
    空瓶×1 个
    反应 mix 的制备：临用前取 0.8mL
    试剂四至空瓶中，再加 40mL 的 35%
    高氯酸（14mL 高氯酸（自备）+26mL
    蒸馏水），混合，备用，4℃保存。
    标准品
    粉体 mg×1 支
    4℃保存
    若重新做标曲，则用到该试剂。
    三、所需的仪器和用品：
    可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、水浴锅、离心机、可调式移液器、
    研钵、高氯酸、冰。
    四、吲哚乙酸氧化酶（IAAO）活性测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样
    本和试剂浪费！
    1、 样本制备：
    ① 组织样本：
    取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，冰浴匀浆，12000rpm，4℃离心 10min，取上清液待用。
    【注】：若增加样本量，可按照组织质量（
    g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
    ② 液体样本：澄清的液体直接检测；若浑浊则离心后取上清检测。
    2、 上机检测：
    ① 可见分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 530nm，蒸馏水调零。
    ② 在 EP 管依次加入：
    试剂名称（μL）
    测定管
    对照管
    空白管（仅做一次）
    试剂一
    100
    100
    100
    试剂二
    100
    100
    100
    试剂三
    200
    200
    样本
    100
    100
    提取液
    500
    700
    600本试剂盒仅供科研使用
    2
    ③ 显色反应：
    上述反应混合液
    300
    300
    300
    反应 mix
    600
    600
    600
    30℃避光反应 30min，于 530nm 读取吸光值 A，
    △A=A 空白-(A 测定-A 对照)。
    【注】若 A 测定管低于 0.2，则可以缩短反应时间 T（如减至 15min），或减少加样体
    积 V1(如减至 50μL)，则改变后反应时间 T 或加样体积 V1 需代入计算公式重新计算。
    五、结果计算：
    1.标准曲线：y = 0.1148x-0.0194，x 为标准品浓度(μg/mL)，y 为吸光值ΔA。
    2、按样本蛋白浓度计算：
    单位定义：每毫克组织蛋白每小时内分解 1μg 的 IAA 定义为一个酶活力单位。
    吲哚乙酸氧化酶（IAAO）活力（μg/h/mg prot）＝[(ΔA+0.0194)÷0.1148]×V2÷(V1×Cpr)÷T
    =174.2×(ΔA+0.0194)÷Cpr
    3、按样本鲜重计算：
    单位定义：每克组织每小时内分解 1μg 的 IAA 定义为一个酶活力单位。
    吲哚乙酸氧化酶（IAAO）活力（μg/h/g 鲜重）＝[(ΔA+0.0194)÷0.1148]×V2÷(W×V1÷V)÷T
    =174.2×(ΔA+0.0194)÷W
    4、液体中 IAAO 活力的计算:
    单位定义：每毫升液体每小时内分解 1μg 的 IAA 定义为一个酶活力单位。
    吲哚乙酸氧化酶（IAAO）活力（μg/h/mL）＝[(ΔA+0.0194)÷0.1148]×V2÷V1÷T
    =174.2×(ΔA+0.0194)
    V---提取液体积，1mL；
    V1---加入反应体系中样本体积，0.1mL；
    V2---水浴步骤反应总体积：1mL；
    T---反应时间，30min=0.5h；
    W---样本质量，g；
    Cpr----样本蛋白质浓度，mg/mL，建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。
    附：标准曲线制作过程：
    1 标准品母液（1mg/mL）：临用前加 1mL 蒸馏水溶解。
    2 把母液稀释成以下浓度梯度的标准品：0, 7, 14, 21, 28, 35μg/mL。也可根据实际样本
    来调整标准品浓度。
    3 按照空白管反应体系检测，试剂三换成各个浓度标准品，根据结果即可制作标准曲
    线。
    30℃水浴反应 30min（准确时间）

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