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甜菜碱(Betaine)试剂盒

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  • ￥480
  • wksubio
  • WS2210F
  • 国内
  • 2025年10月20日
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    上海瓦兰生物科技有限公司
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    • 英文名：

      Betaine Reagent Kit

    • CAS号：

      WS2210F

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    甜菜碱（Betaine）含量试剂盒说明书
    （货号：WS2210F 分光法 48 样）
    一、产品简介：
    甜菜碱是一种广泛分布于动植物及微生物体内的生物碱。其在强酸条件下和雷氏盐发生
    反应产生红色沉淀，沉淀用丙*溶解形成粉红色溶液，在 525nm 处有特征吸收峰，测定
    525nm 处的吸光值，可计算得样品的甜菜碱含量。
    二、测试盒组成和配制：
    【注】：试剂一配制时 pH 严格控制为 1，否则会导致反应不完全，配制后尽快使用。
    三、所需的仪器和用品：
    可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、可调式移液器、天平、离心机、甲
    醇、石*醚、盐酸、*酮和蒸馏水。
    四、甜菜碱含量测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、样本制备：
    ① 组织样本：
    取烘干后过 60 目筛的样品约 0.1g，加 1mL 的 80%甲醇溶液，置于 60℃提取 30min，
    期间不断震荡。12000rpm，25℃离心 15min，取上清液待测。
    ② 细菌/细胞样本：
    先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加 1mL 的
    80%甲醇溶液，置于 60℃提取 30min，期间不断震荡。12000rpm，25℃离心 15min，
    取上清液待测。
    【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。
    ③ 液体样本：若是澄清液体样本则直接检测，若是浑浊液体则需离心后取上清液测定。
    2、上机检测：
    ① 可见分光光度计预热 30min，调节波长至 525nm，用 70%丙*调零。
    ② 在 EP 管中按照下表依次加试剂：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    试剂一
    粉剂 mg×2 瓶
    4℃保存
    临用前，每瓶加 14mL 蒸馏水溶解，
    加 280µL L 浓盐酸调 pH 为 1。
    99%石*醚
    自备
    4℃保存
    5.94mL 石*醚（60-90℃），
    加 0.06mL 蒸馏水，混匀。
    70% *酮
    自备
    4℃保存
    丙*：蒸馏水=7:3
    标准品
    粉剂 mg×1 支 -20℃保存
    若重新做标曲，则用到该试剂
    试剂（µL）
    测定管
    空白管（只做一次）
    样本
    150
    蒸馏水
    150
    试剂一
    500
    500
    混匀，4℃反应 2h，12000rpm，25℃离心 15min，弃上清
    （上清液可用移液器移除，务必完全移除。）
    99%石*醚
    500
    500
    12000rpm，25℃离心 10min，弃上清，可继续置于 60℃烘箱中（约本试剂盒仅供科研使用
    2
    【注】：若ΔA 较小在零附近徘徊，可增加样本取样质量 W 或加样表中样本加样体积 V1，
    则改变后的 W 和 V1 需代入计算公式重新计算。
    五、结果计算：
    1、标准曲线方程：y=3.2829x-0.0004：x 是标准品的质量（mg）; y 是ΔA。
    2、按照质量计算：
    甜菜碱含量(mg/g 干重)=[(ΔA+0.0004)÷3.2829]÷(W×V1÷V)
    =2.031×(ΔA+0.0004)÷W
    3、按细胞数量计算：
    甜菜碱含量(μg/104 cell)=[(ΔA+0.0004)÷3.2829]÷(500×V1÷V)×103
    =4.06×(ΔA+0.0004)
    4、按液体体积计算：
    甜菜碱含量(μg/mL)=[(ΔA+0.0004)÷3.2829]÷V1×103
    =2030.7×(ΔA+0.0004)
    V1---反应中样本体积，0.15mL；
    V---加入提取液体积，1mL；
    W---样本质量，g；
    500---细胞数量，万；
    附：标准曲线制作过程：
    1 制备标准品母液（1mg/mL）：向标准品 EP 管里面加入 1mL 蒸馏水（母液需在两天
    内用且-20℃保存）。
    2 把母液稀释成六个浓度梯度的标准品：0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1. mg/mL。也可根据实际
    样本来调整标准品浓度。
    3 依据测定管的加样表操作，根据结果即可制作标准曲线。
    30min），至风干为止。
    70%丙*
    1000
    1000
    震荡使沉淀充分溶解，取全部澄清液体至 1mL 玻璃比色皿（光径
    1cm）中，在 525nm 处测定，ΔA=A 测定-A 空白。

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    图标文献和实验
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    • 甜菜碱 betaine

      　　 为三烷基氨基酸之总称，系含四级铵的两性电解质。特别是也有把三甲甘氨酸（ timethyl glycine）称为甜菜碱的。甜菜碱广泛存在于生物体内，在甜菜的糖浆中含量很多，它是从胆碱经两个阶段的脱氢酶反应而生成的。由专一的甲基转移酶将甲基转移给同型半胱氨酸而形成蛋氨酸，其本身则变为 N， N-二甲甘氨酸。这里经过两个阶段的氧化，甲基作为甲醛的形式而分离，再经甲氨基乙酸（ N-甲甘氨酸）变为甘氨酸。  

    • PCR佐剂手册

      : 1 Nucleic Acids Research 18 : 1666   Betaine (N,N,N-trimethylglycine = [carboxymethyl]trimethylammonium)   Biochemistry 32 : 137 BioTechniques 21

    • 宁夏枸杞(barbary wolfberry)

      起皱，再曝晒或烘至外皮干硬，筛去果柄，密封贮藏。春、秋季挖取根部，洗净，剥皮晒干。嫩枝和叶可作菜食用。 果实含有甜菜碱(Betaine)、胡罗卜素(Carotene)、抗坏血酸(Ascorbic acid)、烟碱(Nicotine)、硫胺素(Thiamine)、核黄素(Riboflavin)等。味甘，性平。有滋补肝肾、益精明目的功能。用于治疗目错、眩晕、耳鸣、腰膝酸软、糖尿病等症。根皮味甘，性寒。有益阴凉血、清肺降火之功能。用于治疗阴虚潮热、盗汗、心烦、口渴、咳嗽和咯血等症

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