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- 赛泓瑞生物
- 进口
- SHC975H
- 2025年07月20日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
SHCC
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
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种属 |
人 |
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别称 |
A204 |
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组织来源 |
肌肉 |
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疾病 |
横纹肌肉瘤 |
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传代比例/细胞消化 |
1:2传代，消化2-3秒 |
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完全培养基配置 |
McCoy’s 5A培养基；10%胎牛血清；1%双抗 |
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简介 |
该细胞系源自一位患有横纹肌肉瘤的1岁女孩的肌肉组织，由D.J.Giard建立。 |
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形态 |
上皮细胞样 |
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生长特征 |
贴壁生长 |
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倍增时间 |
~36h |
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致瘤性 |
Yes, in nude mice; forms small cell malignant tumor consistent with embryonal rhabdomyosarcoma; also tumorigenic in newborn mice treated with anti thymocyte serum |
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STR |
Amelogenin: X CSF1PO: 10,13 D13S317: 11,12 D16S539: 11,12 D5S818: 12 D7S820: 8,10 THO1: 8,9.3 TPOX: 8,9 vWA: 15,17 |
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培养条件 |
气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 |
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冻存条件 |
冻存液：90%FBS，DMSO 10%, 或使用非程序冻存液：官网货号SH-H040 |
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保藏机构 |
ATCC; HTB-82 |
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产品使用 |
仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
1）复苏细胞：将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
- 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
a、收集细胞，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识，因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……，这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁，要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
1) 细胞消化液的配制及存储：我采用的是0.25%Trypsin+0.05%EDTA的消化液，BUFFER采用的是D-Hank's液。配完后分装成4-5ml/tube，于-20度冰箱中储存。2) 消化前的处理：当细胞生长至亚融和状态需要传代时，提前半小时将配好的消化液放在细胞培养孵箱中预热，同时将配好的高压无菌的D-Hank's液也进行预热。3) 消化细胞：将预热的D-Hank's液洗细胞2次，2ml/25cm2，然后再加入预热的消化液，作用3-5min，并反复振荡，镜下观察。当细胞被消化
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