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- 赛泓瑞生物
- 进口
- SHC958H
- 2025年07月20日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
SHCC
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
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种属 |
人 |
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别称 |
U-118 MG; U-118-MG; U118-MG; U118MG; U118; 118 MG; 118MG |
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组织来源 |
脑 |
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疾病 |
胶质母细胞瘤；四级 |
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传代比例/细胞消化 |
1:2传代，消化1-2分钟 |
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完全培养基配置 |
DMEM培养基；10%胎牛血清；1%双抗 |
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简介 |
注意： 据报道来自不同个体的胶质母细胞瘤细胞株U-118 MG (HTB-15) 和 U-138 MG (HTB-16)有着一致的VNTR和相近的STR模式。 U-118 MG 和 U-138 MG细胞遗传学上很相似并有至少六个衍生标记染色体。 这是1966年至1969年间J. Ponten和同事从恶性神经胶质瘤中构建的细胞株中的一株(其它包括ATCC HTB-14和 ATCC HTB-16 and ATCC HTB-17)。 1987年用BM-Cycline培养6周去除了支原体污染。 |
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形态 |
混合型 |
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生长特征 |
贴壁生长 |
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倍增时间 |
每周 2 至 3 次 |
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STR |
melogenin: X,Y CSF1PO: 11,12 D13S317: 9 D16S539: 12,13 D5S818: 11 D7S820: 9 TH01: 6 TPOX: 8 vWA: 18 |
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培养条件 |
气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 |
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冻存条件 |
冻存液：90%FBS，DMSO 10%, 或使用非程序冻存液：官网货号SH-H040 |
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保藏机构 |
ATCC; HTB-15 |
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产品使用 |
仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
1）复苏细胞：将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
- 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
a、收集细胞，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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文献和实验，合成一条新的与模板 DNA 链互补的半保留复制链。重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的「半保留复制链」，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需 2～4 分钟， 2～3 小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。二 实验试剂与器材模板 DNA、2.5 mmol/L dNTPTaq DNA 聚合酶（5 U/μL）、SSR 引物10 ×buffer、15 mmol/L Mg2+、ddH₂OPCR 仪、移液枪、PCR 板三 实验步骤1.配制 20 μL 反应体系，在 PCR 板中
后鉴定。可以加蛋白酶抑制剂(PMSF)0.1mg/ml保存。
得到表达。（7）揭示某些与基因表达调控有关的DNA序列元件。DNA转染技术现已变成研究基因功能和组分的重要工具，已发展了很多转染方法，并成功应用于转染各种细胞。目前广泛应用方法有磷酸钙共沉淀法、电穿孔法、病毒载体，以及阳离子脂质体介导转染法。进行真核转染的一般程序：克隆目的基因（经测序验证）－准备真核表达载体－将目的基因插入表达载体中－转染－筛选－鉴定下面以pcDNA3为载体，p16为目的基因，介绍真核转染的实验操作。一、试剂准备1、HBS（Hepes-buffered saline）：876mg
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