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- FY-K2723Z
- 2026年01月04日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
耐长春新碱结肠癌细胞,VCR终浓度1μg/ml
- 库存：
100
- 细胞类型：
详见说明
- 品系：
详见说明
- 组织来源：
详见说明
- 相关疾病：
详见说明
- 物种来源：
ATCC、DSMZ、ECACC、中科院等
- 免疫类型：
详见说明
- 细胞形态：
详见说明
- 器官来源：
详见说明
- 运输方式：
常温或者干冰
- 年限：
详见说明
- 生长状态：
贴壁/悬浮
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 细胞运输： | 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输（T25细胞瓶） |
显微镜下部分细胞产品的形态： 
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文献和实验Analysis of the effect of PECAM1 on the migration and invasion of gastrointesti- nal stromal tumor cells based on single－cell transcriptome sequencing data
期刊：MODERN ONCOLOGY，Aug．2023，VOL. 31，No. 16
作者：HU Wu1，WEN Yiqiao2，QIN Jialan1，ZHAO Ying3，ZHANG Tianbiao1
DOI：10．3969 /j．issn．1672－4992．2023．16．003
配制方法如下: 取上述磷酸盐缓冲液 6.0 mL、镁钾溶液 0.4 mL、葡萄糖- 6 -磷酸钠盐溶液 1.0 mL、辅酶 II 溶液 1.6 mL、肝 S9 组分 1.0 mL，混匀，置冰浴中待用。1.3 肌动蛋白聚合抑制剂细胞松弛素 B(CytochalasinB，cytoB) 溶液用二甲基亚砜 ( DMSO) 配制适当浓度的储备液，避光冷藏保存。cytoB 的终浓度通常为 3 μg/ mL ～6 μg/mL，实验室应根据各种细胞系选择 cytoB 的适当终浓度，以达到理想的双核细胞出现
染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状。细胞凋亡率由以下公式计算： 2.材料 细胞来源：HL-60细胞株，由南京铁道医学院血液科研究室提供。 AO/EB染料: 精确称取AO(Fluka产品)、EB(Fluka产品 )各1mg，分别溶于10ml pH7.2 PBS中使之配成100μg/ml的储备液，用前等量混合，备用。 3.方法 3.1 HL-60细胞培养：将1×106/ml HL-60细胞接种于含20％小牛血清的RPMI 1640培养液中，加Ara-C终浓度为10μg/ml，置37℃、5％CO2
/L～ 0.8 mmol/L对人γδT细胞杀伤肿瘤细胞活性有增强作用，高于这一浓度能明显抑制γδT细胞生长和引起细胞凋亡，并且减低其杀伤活性，而对肿瘤细胞株需达到3.2 mmol/L以上（血药浓度达576 μg/ml）时才有上述作用。这一结果与Paolo报道的：阿司匹林浓度加到3mM时还不能明显抑制大肠癌细胞的增殖和提高凋亡率相一致[12]。当阿司匹林浓度达到3.2 mmol/L时不仅会对存在于肠粘膜中的自身γδT细胞有显著的抑制作用，同时当血药浓度超过200μg/m -300μg/ml后，亦可
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