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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
ATCC
- 库存:
1
- 细胞类型:
上皮细胞样
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
ATCC
- 相关疾病:
肿瘤研究等
- 物种来源:
ATCC
- 免疫类型:
ATCC
- 细胞形态:
不规则梭形
- 器官来源:
ATCC
- 运输方式:
顺丰快递
- 年限:
理论永生化
- 生长状态:
贴壁
- 规格:
T25/1*10^6
产品名称:人正常卵巢上皮细胞IOSE-80
由于后台限制,导致上传产品英文、CAS号、价格、细胞类型形态状态等可能不符,建议直接咨询客服了解该产品具体信息,或可以登录我司官网查询
我司绝大多数人源细胞系均可提供STR鉴定报告,如下图示例:
细胞收到后处理
培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是运输细胞的最好办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,消毒后放到超净台内严格无菌操作,将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(最好40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售后依据,不提供照片默认收到状态良好。(注意密封培养瓶放入培养箱时要将盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基,以便进行对比培养)
客户收到细胞也可以向我司索取细胞图,如下为人浆细胞白血病ARH-77细胞图:
人脐静脉血管内皮细胞HUVEC细胞图如下:
人正常卵巢上皮细胞IOSE-80培养步骤
细胞传代:如果未超过80%汇合度时,将瓶装的完全培养液收集至离心管中,留5ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;如果细胞密度超80%,即可进行传代培养,传代具体步骤如下细胞传代:
A1、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
A2、悬浮细胞冻存:
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,将T25 培养瓶中的悬液收集至离心管中1000rpm
离心5min;
2、弃上清,沉淀细胞加入1ml/支的雅吉生物无血清冻存液(C7001),混匀后加入冻存管中。(如:冻一支,加入 1ml 无血清冻存液即可)
3、将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可;如后期要将细胞转入液氮罐中,需在-80℃冰箱存
放 24 小时以上。
B1、对于贴壁细胞,传代可参考如下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,使之完全脱落后吸出,然后将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL完全培养基重悬。
4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养。
B2、贴壁细胞冻存:
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min;
3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:C7001),混匀后加入冻存管中。
人正常卵巢上皮细胞IOSE-80复苏:
1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4、第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
如需细胞培养基,亦可联系我司购买,量大从优:
人正常卵巢上皮细胞IOSE-80注意事项:有些细胞比较特殊,如贴壁不牢,在运输过程中发生容易细胞脱落,这是正常现象。请将培养瓶所有培养液收集至离心管,1000rpm离心5min,收集上清作过渡培养(后期对比培养),沉淀加入胰酶1-2ml,轻轻吹打,重悬,消化1-2分钟后,加5ml完全培养基终止反应。再离心,弃上清,加1-2ml完全培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代(两个T25),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养。
我司细胞库数量众多,欢迎有实力经销商与我司洽谈折扣优惠
欢迎新老客户咨询订购:人正常卵巢上皮细胞IOSE-80
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文献和实验后应立即少量分装于无菌试管中, 保存于4°C, 避免反复冷冻解冻造成DMSO 之裂解而释出有害物质, 并可减少污染之机会。若要过滤DMSO, 则须使用耐DMSO 之Nylon 材质滤膜。 15. 冷冻保存细胞之方法? 冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。 冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至-80 ℃ 以下
Vero(非洲绿猴肾细胞)培养指南 Vero细胞由日本千叶大学的Yasumura和Kawakita从正常成年非洲绿猴肾脏建株,1964年带到NIH时已传至第93代,是目前科研中广泛使用的经典细胞系。 细胞特性与应用场景 该细胞应用广泛,可用于Vero毒素检测、绞牛肉中的病毒检测、功效测试、疟疾研究、培养基测试和支原体检测,也是一种合适的转染宿主和疫苗生产常用细胞。 形态特征与生长方式 贴壁生长,呈上皮细胞样(卵圆形或多边形),贴壁依赖性较强,传代时需用胰酶充分消化,一般消化
风干。如果需要在下室面铺FN的话,可将200 ul枪头的尖端剪掉,吸取FN均匀涂抹在小室的下面。用胶原(collagen)的话,一般配成0.5 mg/ml,直接用枪吸了涂在膜上。② 水化基底膜:吸出培养板中残余液体,每孔加入50ul含10g/LBSA的无血清培养液,37 ℃,30min。另有tianjin_glioma战友提供的方法:在上室的聚碳酸酯膜上加入稀释后的Matrigel (3.9 ug/ul) 60-80 ?l (注意体积不可太大,以刚把聚碳酸酯膜浸湿为最好),置37 ℃ 30 min
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