昆虫谷氨酰胺合成酶(GS)ELISA科研试剂盒

【专题讨论】杆状病毒——昆虫细胞蛋白表达系统，影响蛋白表达的因素？

-6及阳性对照Bacmid/CAT，已构建成功。 2.  昆虫细胞Sf9、High Five及其相关培养基、转染试剂均购自Invitrogen公司。抗His单克隆抗体购自Oncogene公司，CAT-ELISA试剂盒购自 Roche。 实验步骤： 一、  昆虫细胞转染： 1．  Sf9细胞计数，取6孔板中的两孔，每孔加入9×10 5个细胞(其中一孔设为正常对照)，并以全培培养至少1小时，使细胞贴壁。 2．  准备重组质粒和细胞转染试剂的混合物： a.  溶解1μg纯化重组杆状

NSMB：徐华强 / 谢欣 / 蒋轶发现孤儿受体 GPR119 内源性配体的分子机制

119。研究发现，在不加任何外源配体的情况下，GPR119 即能结合细胞膜中的溶血磷脂酰胆碱（lysophosphatidylcholines，LPC）并被其激活，完美解释了一些受体的所谓「自激活」现象其实是由未知内源配体导致。研究还解析了 GPR119 与临床阶段小分子候选药物 APD668 复合物的冷冻电镜结构，并阐明了受体偶联下游 Gs 信号蛋白的分子机制。 为了研究 GPR119 的结构，研究人员从昆虫细胞中表达纯化了人源 GPR119 受体和 Gs 蛋白三聚体的复合物样品，并在未加入小分子配体

ELISA protocol

ELISA protocol： 1.取5－10ul BMMY表达上清用0.05M NaHCO3稀释到100ul铺ELISA板，37度或室温振荡大于1小时。注意一定要做一个GS115空菌株表达上清作为阴性对照，最好还找一个带有histag的蛋白作为阳性对照。 2.TPBS洗板3次，方法：倒掉铺板液，倒置于毛巾上轻轻拍打几次，加TPBS至满，重复。 3.加封闭液（TPBS加1％脱脂奶粉）350ml/孔，室温下放置40分钟－1小时，TPBS洗3次。 4.加封闭液稀释