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实验动物
裸鼠,雌雄各半,4-6周,18-20g
造模方法
将Huh-7细胞用胰酶消化后,收集到一起。无血清的培养基洗涤一次后进行细胞计数。将计数好的细胞用无血清的培养基重悬调整细胞密度为2×107/ml待用。采用10%水合氯醛对裸鼠进行腹腔麻醉,取仰卧位固定在手术板上,常规皮肤消毒,在裸鼠左肋下作一横行切口,然后逐层剪开皮肤暴露肝左叶。用1毫升注射器抽取100μlHuh-7细胞悬液,30°角刺入肝脏左叶,缓慢的注入细胞悬液,注射完毕后用无菌纱布轻压针孔至肝脏表面不再出血,逐层缝合关腹,待小鼠清醒后放回原饲养环境。
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文献和实验恶性肿瘤的主要生物学特性之一是转移性,建立与临床表现相近的动物模型是研究的关键环节。人体肿瘤移植于裸小鼠建立人癌异种移植动物模型为深入研究提供了可能。原位移植可为人体肿瘤生长提供相似的微环境,更利于肿瘤恶性行为的表现,因此,大多采用原位移植的方法建立肿瘤转移动物模型。 根据我们多年的肿瘤模型构建经验,为大家介绍几种我们常遇到的几种肿瘤模型构建方法,以供参考。 一、人肝癌原位移植模型 将人肝癌细胞株(如:HepG2等)传代培养后,收集对数生长期的细胞制成
的治疗效果。 研究团队在建立的皮下胰腺癌肿瘤小鼠模型、原位胰腺癌肿瘤小鼠模型和患者来源的异种移植瘤小鼠中进行实验,可以发现共表达CXCR-6的T细胞相比较而言会表现出增强的瘤内积累,具有更持久的抗肿瘤活性,进而延长动物的生存时间。最后研究团队提出:通过在特异性CAR T细胞上共表达肿瘤特异性的趋化因子受体,是增强获得性免疫疗法治疗实体瘤的一种新策略。 研究团队为了确定胰腺癌小鼠模型中合适的趋化因子靶点,使用QPCR的方法定量不同趋化因子的RNA水平。实时荧光定量PCR(Quantitative Real
,也可通过产生新的适应性突变来逃避治疗干预。与此同时,肿瘤细胞与微环境中的免疫细胞、基质细胞等通过复杂的信号交互进一步重塑生态位,持续推动肿瘤的进化进程。因此,深入解析肿瘤发生、发展与进化的分子机制,对于开发高特异性早期诊断标志物、精准预测疾病进展轨迹及制定个体化治疗策略具有至关重要的理论与临床价值。 接下来,我们将通过典型案例,阐述如何利用单细胞与空间组学技术解析肿瘤的发生、发展与进化过程。 案例一:空间原位分析构建食管癌单细胞多阶段空间动态演化图谱 发表期刊:Cancer Cell 影响
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