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100+
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上海维亦特生物
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48T/96T
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文献和实验复合物Ⅳ又称细胞色素c氧化酶(cytochrome c oxidase)。总相对分子质量为200kDa。复合物Ⅳ是以二聚体的形式存在,它的亚基Ⅰ和Ⅱ都含有4个氧化还原中心(redox-active centers)和两个a型细胞色素(含有1个a、1个a3)和两个Cu。主要功能是将电子从细胞色素c传递给O2 分子, 生成H2O∶4cyt c2 O2 4H → 4cyt c3 2H2O。每传递一对电子,要从线粒体基质中摄取4个质子,其中两个质子用于水的形成,另两个质子被跨膜转运到膜间隙
当线粒体状态发生变化时,大家先想到的往往是ATP、膜电位和ROS,而深入开展机制研究时,还需要进一步考察线粒体呼吸功能、电子传递链活性、mtDNA拷贝数、线粒体形态动力学和线粒体自噬等多个维度。 开展实验设计时,可以先从三个层面选指标: 能量输出:OCR、ATP、呼吸链复合体活性 功能状态:膜电位、ROS、线粒体Ca²⁺ 数量与质量控制:mtDNA、线粒体形态、线粒体自噬 一般可以先用2~4个互补指标建立线粒体功能变化,再根据结果补充机制实验。 图1丨线粒体结构示意图
可以看出CoQ在复合物Ⅰ与Ⅲ,Ⅱ与Ⅲ之间传递还原当量,Cyt c在复合物Ⅲ与Ⅳ之间传递还原当量。他们又将这四种复合物1:1:1:1的比例混合,加上CoQ和Cyt c重组,基本上恢复了线粒体原有的催化能力。 借助上述 实验方法 ,呼吸链各组分的排列顺序已基本明确,但仍有些不一致的看法,其中以CoQ至细胞色素C这一部分研究得还很不清楚,对于Fe-S和CoQ的定位和数量也有争议。 (二)氧化呼吸链 1.NADH氧化呼吸链 人体
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