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- 详细信息
- 文献和实验
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100+
- 供应商:
上海维亦特生物
- 规格:
48T/96T
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文献和实验人端粒酶(TE) 酶联免疫 分析( ELISA ) 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中 端粒酶(TE)的 含量。 实验原理 : 本试剂盒应用双抗体夹心法测定 标本 中 人端粒酶(TE) 水平。用纯化的 人端粒酶(TE) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 端粒酶(TE) , 再与HRP 标记的 端粒酶(TE) 抗体结合,形成抗体- 抗原 - 酶标抗体复合
。 将沉淀DNA干燥后溶于TE缓冲液中,保存在-20℃。 3. 制备抗体-亲和素-DNA复合物 将生物素标记的抗体与亲和素按等分子浓度混合于含有1mg/mlBSA的PBS中,室温孵育30min,再加入两倍分子浓度的生物素标记的DNA片段,继续孵育30min,最后加入10倍分子浓度的生物素,将亲和素分子上的结合部位饱和。最后过凝胶过滤柱将复合物与未结合的单体分开,加入BSA达1mg/ml,分装后冻存于-20℃。4. 免疫PCR(1) 按常规ELISA方法,用饱和缓冲液稀释抗原,加到96孔塑料
l,稍加振荡,离心洗涤2次↓4℃ 12000r/min×5min离心去上清敞开管口,将管置于实验桌上直到最后可见的痕量乙醇蒸发殆尽↓溶沉淀于11μl TE溶液中↓ ↓取1μl电泳 其余进行酶切2.、经0.7%琼脂凝胶电泳,确定有质粒DNA后,用XhoI进行酶切。酶切反应体系:质粒DNA 10μlXhoI 6μl10*Buffer(H) 6μlDW 38μl-----------------------总体积 60μl 37℃消化过夜3. 用WizardTMPCR纯化试剂盒回收IL-2 DNA
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