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上海维亦特生物
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文献和实验Cell Reports:西湖大学吴连锋团队揭示生命早期维生素 B12 对成年期代谢与生殖性状的决定性作用及分子机制
能力才能恢复正常。由此证实,生命早期 B12 决定了线虫成年期脂质含量和生殖水平,且该效应存在一个重要的时间窗口。 图 2. 生命早期 B12 决定生物体成年期脂质水平与生殖能力 B12 是甲硫氨酸循环代谢途径中的关键辅因子。研究者发现,当甲硫氨酸循环途径被阻断时,B12 缺乏的线虫表现出更为严重的脂质累积和生殖缺陷,且无法通过补充 B12 来挽救。同时,阻断甲硫氨酸循环会激活固醇调节元件结合蛋白 SBP-1/SREBP1,引起线虫的脂质水平显著升高;在 B12 缺乏的线虫中抑制 SBP
膜的改变是这些特征中较早出现的一种。在凋亡细胞中,细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的外侧。Annexin-V是一种35-36 KD的钙粒子依赖的磷脂结合蛋白,它对PS具有较高的亲和力。细胞凋亡时,可以和外翻的PS结合,从而可以检测凋亡的细胞。发生坏死的细胞其细胞膜上的PS也外翻,因而也会阳性。因此,常用的凋亡试剂盒除了采用Annexin-V标记之外,还会加一种DNA染料,常用的有PI和7-AAD,由于坏死的细胞膜通透性增高,染料可以进入细胞内和DNA结合,从而可以发荧光,区分出坏死
6C5)能够与鱼、蛙、鸡、兔、小鼠、大鼠及人组织来源的GAPDH反应,但不能与酵母GAPDH反应。一般我们选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上。 图示: A-G分别表示不同实验小鼠心脏蛋白(上样量50ug),兔抗小鼠Akt抗体(康成生物Cat#KC-5A01)检测心脏组织匀浆中Akt水平。加入兔二抗(康成生物Cat#KC-RB-035,稀释比例为1:5,000)时同时加入HRP标记的抗GAPDH单抗(稀释比例为1:10,000,康成生物Cat#KC-5G5)。采用化学发光试剂盒
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