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- 详细信息
- 文献和实验
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99
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详询
- 供应商:
广州市左克生物
- 保存条件:
详询
- 规格:
48T/盒
【产品名称】
通用名称:RNA 恒温快速扩增试剂盒(荧光型)-II
【包装规格】
货号:WLRE8208KIT
规格:48 份/盒
【原理概述】
本试剂盒基于一种常温恒温核酸快速扩增技术:在常温恒温下,特殊修饰的反转录酶利用特异性引物 DNA 和模板 RNA 合成cDNA 链,反应体系中的重组酶、单链 DNA结合蛋白和 DNA 聚合酶以新合成的 cDNA链为模板进行快速核酸扩增反应。本试剂盒在 42 ºC 下,依赖核酸外切酶的作用,加入根据模板设计的特异的分子探针,使用荧光监测设备能实现对目标片段扩增过程的实时监控。适用于实验室级别的 RNA 扩增以及其他检测用途的 RNA 扩增使用。
【产品特点】
本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、反应时间短(仅需 20 min)等优点,反应组分为干粉状态,操作简便,易于保存。
可适用于各种品牌的荧光定量 PCR 仪,恒温荧光扩增仪器等荧光检测设备。
【引物设计】
建议使用长度在 30-35 bp 的引物,引物过短会影响扩增速度和检测灵敏度;引物设计避免形成二级结构而影响扩增;扩增子长度建议在 150-500 bp。
【荧光探针设计】
探针序列不与特异性引物识别位点重叠,长度为 46-52 nt,序列避免回文序列、内部二级结构和连续的重复碱基。探针共有四个修饰位点:距离 5’端的≈35 nt 的中部位置标记一个 dSpacer(四氢呋喃,THF),作为核酸外切酶的识别位点;THF 位点的上游标记一个荧光基团,下游标记一个粹灭基团,两个基团的间距为2-4 nt;THF 距离3’末端≥15 nt,并且 3’末端标记一个修饰基团,例如胺基、磷酸基团或 C3-Spacer。


【试剂盒储存】
1.运输温度:≤20ºC的恒温环境;
2.储存条件:储存温度≤-20°C(±5°C)恒温环境,避光保存,避免重压、反复冻融;
3.产品有效期:14个月;
4.生产日期见外包装。
【注意事项】
1. 由于试剂盒灵敏度非常高,在进行反应时请注意避免核酸污染,并设置空白对照;
2.使用时请取出实验所需的 MIRA 反应单元的数量,剩余部分请置于存储条件下。
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文献和实验分子的RNA(200nt以上),小分子RNA往往被淘汰掉,因而不适用于小分子RNA的分离纯化。有机溶剂抽提能够较好的保留小分子RNA,但是后继的沉淀步骤比较费时费力。MirVana miRNA Isolation Kit是采用玻璃纤维滤膜离心柱(glass fiber filter,GFF),既能够有效富集10mer以上的RNA分子,又能够兼备离心柱快速离心纯化的优点,是一个不错的选择。对于特别稀有的分子,由于需要分离大量RNA而导致高背景而降低灵敏度,还可以进一步富集10mer到200bp的小分子RNA
HNADOCK - 一个研究 RNA 与 DNA/RNA 互作的平台
,是目前的有效方式。在这里,我将介绍一款用于核酸对接的用户友好型在线平台 HNADOCK,它由华中科技大学的 Yi Xiao 和 Sheng-You Huang 团队开发。HNADOCK 可以用于建模两个核酸分子(RNA/DNA)之间的 3D 复合体结构。HNADOCK 的速度很快,通常可在 10 分钟内完成工作。HNADOCK 在线平台主页图片来源:HNADOCK 官网HNADOCK 服务器的工作流程包括四个阶段:数据输入;同源 RNA 搜索;结构建模;基于 FFT 的全局对接1. 数据输入要求用户
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