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上海维亦特生物
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文献和实验Mol Cell:杨薇等揭示 DNA-PK 的激活机制以及自磷酸化对 NHEJ 通路的重要作用
DNA 双链断裂可由外在因素(电离辐射和活性氧等)或内在因素(DNA 复制错误和 V(D)J 重组等)造成,从而激发 DNA 损伤应答,包括 DNA 修复、细胞周期调控、细胞衰老和细胞凋亡等。 DNA 损伤应答由 PIKK(phosphoinositide-3-kinase-related kinase)家族蛋白激酶催化下游蛋白的磷酸化而启动,包括 DNA-PK(DNA 依赖性蛋白激酶)、ATM(Ataxia Telangiectasia Mutated)和 ATR(ATM-Related
偶联受体激酶,有肾上腺素受体蛋白激酶;ARK 相关激酶和视紫红质激酶等。 (7)核糖体 S6 激酶(S6K),包括 S6KⅠ和 S6KⅡ,能催化核糖体 S6 蛋白磷酸化。 (8)整合素连接激酶,整合素连接激酶(intergrin-linked kinase,ILK)可直接磷酸化 PKB/Akt,其活性依赖 PI3K。 (9)DNA 依赖性蛋白激酶,DNA 依赖性蛋白激酶(DNA-depen-dent protein kinaes,DNA-PK) 可磷酸化许多核蛋白,包括核受体、转录
问:哪位知道根据32P 结合至合成肽的量计算AM PK 活力的具体步骤啊?我做的是骨骼肌,知道需要多少含量的骨骼肌,麻烦把详细的步骤告知,谢谢。 答:AMPK是一个蛋白激酶(protein kinase)吗?合成肽就是这个激酶的底物吧?如果是这样的话,您可以参看PKC激酶的测定protocol,很多公司比如sigma都有。(请参看附件,上面有详细的介绍和计算公式)。至于操作过程,简单的说,就是在反应中加入ATP和32P标记的ATP,当然这个体系中有AMPK和合成肽。然后取固定体积点到P81
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