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文献和实验Cell Reports:上海科大朱焕乎团队揭示肠道营养信号如何指挥动物全身的发育进程
酰胺/mTORC1 通路是如何协调动物全身发育依旧是个谜。 针对这些问题,研究人员首先通过大规模的遗传筛选,发现一个从酵母到人中都存在的编码过氧化物酶体膜蛋白 PRX-11 的基因突变,能够使葡萄糖神经酰胺缺乏的线虫突破早期发育停滞,并完成个体发育。进一步的研究发现,破坏其他过氧化物酶体的关键基因如 PRX-5,PRX-3 及 PRX-1 等,均可以造成类似的效果。说明过氧化物酶体的活性事实上在葡萄糖神经酰胺缺失造成的发育停滞中起到了关键作用。通 过组织特异性地回补正常的 PRX-11 基因,研究人员发现肠道
酶、α-1抗胰蛋白酶或纤维蛋白原等高度丰富的血清蛋白都会干扰免疫分析。此外,标记检测抗体或示踪剂分析物是免疫分析中的常见做法。标签可以是酶(如碱性磷酸酶(AP)或辣根过氧化物酶(HRP))、荧光染料、放射性同位素、亲和力标签,如生物素,或者DNA(immuno-PCR中采用)。这些标签也会改变标记对象的属性,并带来新的干扰。 亲和力鉴别法消除干扰 以上提到的这些干扰有一个共同点:它们是由中低亲和力结合问题引起的。相反,一个好的抗体与其表位之间的特异性相互作用具有很高的亲和力。然而,即使足够
3.3 酶的底物 3.3.1 HRP的底物 HRP催化过氧化物的氧化反应,最具代表性的过氧化物为H2O2,其反应式如下: DH2+ H2O2 D+ H2O 上式中,DH2为供氧体,H2O2为受氢体。在ELISA中,DH2一般为无色化合物,经酶作用后成为有色的产物,以便作比色测定。常用的供氢体有邻苯二胺(O-phenylenediamine, OPD)、四甲基联苯胺(3,3',5,5'-tetramethylbenzidine, TMB)和ABTS[2,2'-azino
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