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上海维亦特生物
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48T/96T
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文献和实验在相同的酶。另外,它的相应底物易于制备和保存,价格低廉,有色产物易于测定等。 在ELISA中,常用的酶为辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)和碱性磷酸酶(alkaline phosohatase, AP)。在少数商品ELISA试剂中,应用的酶尚有葡萄糖氧化酶、β-D-半乳糖苷酶和脲酶等。国产ELISA试剂一般都用HRP制备结合物。HRP是一种糖蛋白,含糖量约为18%,分子量为44000,是一种复合酶,由主酶(酶蛋白)和辅基(亚铁血红素)结合而成,是一种卟啉蛋白
现植物中的富含羟脯氨酸的糖蛋白(HRGP)。HRGP 是植物中主要表面糖蛋白。这些定位于细胞壁或细胞质膜外表面的 HRGP,有三类蛋白质:伸展蛋白,阿拉伯半乳糖链蛋白(AGP ) 和茄科凝集素 ( 图 25-2)。伸展蛋白和茄科凝集素含有由丝氨酸- ( 羟脯氨酸 )4 组成的重复序列,这里 的丝氨酸可被 O-糖基化,而羟脯氨酸可被阿拉伯糖链取代 [5] 。这个阿拉伯糖化过程在髙尔基体中发生 [6]。AGP 家族是那些高糖基化的胞外蛋白和细胞质膜蛋白质。其蛋白质部分富含羟脯氨酸(Hyp) 、丝氨酸
和改进,由于这种方法采用放射性核素标记,应用范围受到一定限制,为了进一步提高检测的灵敏度和操作的安全性,进入90年代又陆续发明了各种酶标记法和化学发光法的竞争性ELISA检测试剂盒,这一类检测方法的根本原理都是基于抗体抗原的免疫反应,所有这些试剂盒中采用的抗体全部是兔抗血清或者是经过特异亲和提纯之后的抗cAMP或cGMP的兔多抗,毫无疑问,兔多抗在约四十年的cAMP,cGMP定量检测中做出了巨大贡献,但同时它也有着明显的缺陷: 1,兔多抗对cAMP,cGMP的特异性不高,会
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