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上海维亦特生物
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48T/96T
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文献和实验目前动物用单抗,在动物疫病诊断和检疫、妊娠检测、性别鉴定等方面有广泛的应用,大多以诊断试剂(盒)的形式提供,其中核心试剂为标记的单抗。下面将介绍最常用的几种标记技术。一、酶标记1、辣根过氧化物酶(HRP)标记辣根过氧化物酶(HRP)标记单抗和多克隆抗体的常用方法是过碘酸钠法。其原理是HRP的糖基用过碘酸钠氧化成醛基,加入抗体IgG后该醛基与IgG氨基结合,形成Schiff氏碱。为了防止HRP中糖的醛基与其自身蛋白氨基发生偶合,在用过碘酸钠氧化前先用二硝基氟苯阻断氨基。氧化反应末了,用硼氢
、Zn 、Mg 、Cd 的激光- 时间分辨荧光测定方法。7-碘-8-羟基喹啉-5-磺酸(Ferron)和8- 羟基喹啉-5- 磺酸(H2QS)是两种广络性试剂,它们可以与等金属离子形成荧光络合物。根据这些络合物当在不同介质中,不同增敏剂、掩蔽剂作用下产生不同的荧光特性,从而在多种物质共存时检测某种离子,比如当1.0ml 0.01% H2QS,pH10 的NH4Cl-NH3OH 缓冲液时,Al3+几乎不产生荧光,而Mg2+荧光强度最强,灵敏度比提高20倍。即使其他离子高出400倍共存时,也几乎不影响
酶活性和抗体活性的测定可应用ELISA法、免疫 扩散、DAB-H2O2显色反应测定酶结合物的酶活性,抗体活性及效价、特异性。 (8)HRP抗体结合物的保存:加入等量甘油后,小量分装-20℃存放,防止反复冻融;或加入等量60%甘油4℃保存;不宜加NaN3或酚防腐,否则会影响酶活性。必要时冻干保存,以BSA或脱脂牛奶作保护剂。 程序二: (1)将5mg HRP 溶于0.3mol/L PH8.1 NaHCO3溶液中,加入1%二硝基氟苯无水乙醇溶液0.1ml
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