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- 文献和实验
- 技术资料
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100+
- 供应商:
上海维亦特生物
- 规格:
48T/96T
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文献和实验突变将导致致死型突变,从而得不到突变表型,而 RNA沉默中的病毒诱导的基因沉默(VIGS)是对成株植物诱导产生表型突变,可以对胚发育期致死基因的功能进行研究。RNA沉默通过同源性起作用,如选取所有家族成员的高度保守区,就能沉默整个家族成员。因此,用RNA 沉默分析功能基因就成了分子生物学领域的研究热点。 1.RNA沉默载体的构建方法 Waterhouse等[3]将马铃薯Y病毒(PVY)的辅助因子蛋白(HC-Pro)基因分别正向或反向转入烟草,对其后代杂交分析发现,含有
酶切扩增多态性序列(C1eaved Amplified Polymorphic Sequences,CAPS)
间表现了多态性,并能区分纯合、杂合品系,成为与Mi连锁的共显性标记。Caranta等(1999)获得了辣椒中与抗马铃薯Y病毒病和辣椒斑驳病毒病的抗病基因Pvy4紧密连锁的AFLP标记,将8个标记中最靠近的1个共显性AFLP标记转化成了共显性的CAPS标记。
。Waterhouse等利用马铃薯Y病毒(PVY)蛋白酶基因片段构建IRS载体进行烟草转化,获得抗性植株。Wang等利用含有大麦黄矮病毒(Barleyyellowdwarfvirus,BYDV)PAV株系的复制酶基因片断构建成可产生发夹式RNA结构的载体,并将该载体导入大麦得到强抗性植株并得到稳定遗传。Kalantids等在转黄瓜花叶病毒(Cucumbermosaicvirus,CMV)cDNA反向重复序列的再生烟草植株中检测到一个完全抗性的株系,并且证实烟草病毒抗性直接与siRNA的产生相关。同时接种病毒的转化
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