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上海维亦特生物
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文献和实验mRNA Amplification with T7 RNA Polymerase
on a 42ºC oven and set PCR machine to hold at 70ºC. In an Eppendorf tube add: 1 µg Total RNA 1 µL T7 oligo(dT) primer q.s. to 12 µL with Nuclease-free H2 O Incubate 10 min. at 70ºC. Spin briefly to pull
成的,在此反应过程中,已含有经放射性标记的dATP。第二步过程中,脱氧三磷酸核苷酸浓度提高,并且加入双脱氧的三磷酸核苷酸,DNA 在合成过程中,因加入的双脱氧三磷酸核苷酸而随机终止,形成长短不一的DNA片段。二、材料待测的DNA模板,可用双链或单链模板。三、设备高压电泳仪,测序用电泳槽,照相显影用大号塑料盆,制胶设备,吹风机,放射自显影盒,X光片。四、试剂1、5×T7 DNA聚合酶缓冲液:200mmol/L Tris·Cl,pH7.5,100mmol/L MgCl2,250mmol/L NaCl。2、引物
Oocyte Expression With Injection of Purified T7 RNA Polymerase
of complementary DNA (cDNA). We report on a third expression technique that is based on the combined injection of cDNA and purified T7 RNA polymerase directly into the cytoplasm of oocytes.
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