鸡甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAT)ELISA科研试剂盒

【资源】Western Blot 简略而细致

6C5）能够与鱼、蛙、鸡、兔、小鼠、大鼠及人组织来源的GAPDH反应，但不能与酵母GAPDH反应。一般我们选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上。 图示: A-G分别表示不同实验小鼠心脏蛋白（上样量50ug），兔抗小鼠Akt抗体（康成生物Cat＃KC-5A01）检测心脏组织匀浆中Akt水平。加入兔二抗（康成生物Cat＃KC-RB-035，稀释比例为1：5，000）时同时加入HRP标记的抗GAPDH单抗（稀释比例为1：10，000，康成生物Cat＃KC-5G5）。采用化学发光试剂盒

【资源】个人整理 Western Blot（步骤简略，但注意事项、经验总结、基本原理很全面）

左右）后滤纸贴角吸干，置于保鲜膜内固定于片盒中，迅速盖上胶片，关闭胶盒，根据所见荧光强度曝光。取出胶片立即完全浸入显影液中1-2min，清水漂洗一下后放在定影液中至底片完全定影，清水冲净晾干，标定Marker，进行分析与扫描。2．AP-NBT/BICP显色法：每片NBT/BICP可溶解于30ml水中，使用前将一片分装在30个 EP管中，每张3×9cm的膜取一管配成1ml即可。将PBST或TTBS洗涤过的膜用去离子水稍加漂洗，滤纸贴角吸干，反贴法覆于NBT/BICP溶液液滴上，并用不透明物体（如报纸

聚合酶链反应（PCR）技术的发展和应用

s,37℃60s,72℃120s,共25～30个循环。 　　注：[1]反应缓冲液[10×]含：100mmol/l Tris-HCl pH8.3(25℃), 　　15mmol/L KCl, 15mmol/L MgCl2 , 　　0.01%(W/V)明胶（Sigma G2500） 　　[2]酶储存缓冲液（-20℃）含：50%甘油，100mmol/l KCl, 　　20mmol/L Tris-HCl ph8.0 　　0.1mmol/L EDTA, 1.0mmol/L DTT