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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
TF3-dUTP *1 mM in Tris Buffer (pH 7.5)*
- 库存:
50
- 供应商:
广州市左克生物科技发展有限公司
- 规格:
25nmoles
| Ex (nm) | 554 | Em (nm) | 578 |
| 分子量 | ~1150 | 溶剂 | Water |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品基本信息
产品名称:1mM TF3-dUTP溶液
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
分子量:~1150
溶剂:水
激发波长(nm):545
发射波长(nm):570
产品介绍
1mM TF3-dUTP溶液是美国AAT Bioquest生产的荧光染料,染料修饰的脱氧尿苷5'-三磷酸酯(例如氨基烯丙基-dUTP)可用于通过常规酶促掺入方法(例如逆转录,缺口翻译,随机引物标记或PCR)生产含染料的DNA。这种酶促荧光标记方法广泛用于FISH探针和基于微阵列的实验。该TF3-dUTP共轭物可与Spectrum Orange 滤光片组一起用作橙色荧光色。(Spectrum Orange 是Vysis的商标)。,为您提供优质的1mM TF3-dUTP溶液。
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参考文献
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文献和实验30分钟,加入DTT使终浓度为1mM,加入吐温-20使体积百分比为0.5%,15000g/4℃/20分钟,得到的上清即粗蛋白。 (3)粗蛋白经中速滤纸过滤后,利用工程菌表达的6His作为纯化标记。上清(补足NaCl至终浓度为0.5M)流过已螯合Ni的Ni-NTA柱,该柱先用10倍床体积结合缓冲液(20mM Tris-HCL,0.5MNaCl,PH8.0, 5mM咪唑)平衡;再用5倍床体积洗涤缓冲溶液(20mM Tris-HCL,0.5MNaCl,PH8.0,15mM/30mM咪唑)依次洗涤;最后
c,用-20度预冷的丙酮冷冻固定10分钟 d,PBS清洗 10minX2 e,用新鲜配制的通透液(含0.1%的Triton X-100和0.1%的柠檬酸钠溶液) 室温通透15min。 f,PBS清洗 10minX2 g. 阳性对照组加入DNase I 40ul(1u/ul),37度孵育15min h. PBS清洗 10minX2 i. Roehe试剂盒中的的TUNEL反应缓冲液(含FITC标记的dUTP)和脱氧核糖 核酸末端
)和Dig-dUTP(0.35mmol/L),pH6.5(20℃)。 7、聚合酶Ⅰ大片段(标记级):此管内有25μl 聚合酶Ⅰ大片段(Klenow),2U /μl。 8、(Dig)AP结合物:此管内有200μl多克隆羊抗地高辛配基Fab-片段,结合有碱性磷酸酶750U/ml。 9、NBT:有两管,每管1.25ml,是溶于70%(V/V)二甲基甲酰胺的硝基蓝四唑盐溶液(75mg/ml)。 10、X-磷酸盐:有两管,每管0.9ml,是溶于二甲基甲酰胺的5-溴
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