尾-glucose-BP

HeliScope测序仪

HeliScope测序仪是由Quake团队设计开发的，它实际上也是一种循环芯片测序设备。不过，HeliScope 测序仪最大的特点是无需对测序模板进行扩增，它使用了一种高灵敏度的荧光探测仪直接对单链DNA模板进 行合成法测序。首先，将基因组DNA切割成随机的小片段DNA分子，并且在每个片段末端加上poly-A尾。然 后通过poly-A尾和固定在芯片上的poly-T杂交，将待测模板固定到芯片上，制成测序芯片。最后借助聚合酶 将荧光标记的单核苷酸掺入到引物

逆转录、qPCR 实验还出错？这几点你可能没注意！

可以获得真核生物 mRNA 全长；当 RNA 没有 polyA 尾（原核 mRNA 或 rRNA）或断裂时，就需要考虑使用随机引物进行 RNA 的反转录，随机引物可以很均一的逆转出 RNA 上的信息，但逆转出的 cDNAs 长度都较短。此时，对于扩增真核生物的 total RNA 来说，这时随机引物和 Oligo-dT 引物的混合物能给出一个令人满意的结果。 诺唯赞的 HiScript® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)（R312）或可助

【讨论】有关转录问题

hongandwang 平时交流中，发现对DNA转录成RNA的片段长度问题不是很明朗。究竟起始密码子前多长的一段DNA可能被转录成RNA？而终止密码子后又是多长的一段DNA可能被转录成RNA？从现有分子生物学教材看，似乎应该是起始密码子前的DNA不被转录成RNA（注：假设离前后基因距离较远），转录仅从起始密码子开始；而终止密码子后的40-50bp左右可能被转录成RNA，直至茎环结构前停止转录。不知此理解是否正确，请大家各抒已见。