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- 2026年02月04日
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上海达为科生物科技有限公司
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脑脊髓炎动物模型
一、模型分类与病理适配性
（一）按诱导机制分类
| 模型类型 | 核心病理特征 | 代表物种 | 临床对应疾病 | 优势 | 局限 |
|---|---|---|---|---|---|
| 主动免疫诱导型 | 抗原（MOG/PLP）+佐剂→自身反应性T细胞激活 | C57BL/6小鼠、Lewis大鼠 | 多发性硬化（MS）急性期 | 模拟T细胞介导的自身免疫攻击 | 难模拟慢性进展性MS |
| 被动转移型 | 致敏T细胞输入→靶向CNS脱髓鞘 | SJL/J小鼠 | MS复发-缓解型 | 直接验证T细胞致病性，机制明确 | 缺乏原发性脱髓鞘 |
| 基因工程型 | CRISPR编辑免疫相关基因（如LAG3） | C57BL/6小鼠 | 免疫调节机制研究 | 精准解析特定通路（如Treg代谢失调） | 成本高，需验证临床相关性 |
| 病毒诱发型 | Theiler病毒注入脊髓→慢性脱髓鞘 | SJL/J小鼠 | MS慢性进展亚型 | 自发复发，模拟病毒触发机制 | 潜伏期长（>3个月） |
| 中医证候模型 | 肝郁证+自身免疫诱导 | SD大鼠 | MS肝郁化火证 | 整合神经免疫-内分泌网络 | 证候量化标准未统一 |
注：
- 啮齿类主导（>85%研究）：小鼠侧重机制解析（基因工具齐全），大鼠适合手术操作（脊髓直径＞2mm）；
- 非人灵长类缺位：MS的认知障碍与脑萎缩难以在动物重现。
二、核心模型构建技术详解
（一）主动诱导法标准化流程（以MOG₃₅₋₅₅为例）
| 步骤 | 技术参数 | 关键细节 | 病理标志 |
|---|---|---|---|
| 抗原乳化 | MOG₃₅₋₅₅ 200μg + CFA（1:1） | 三通阀推拉40min至油包水状（滴水面不扩散） | 抗原纯度＞98% |
| 初次免疫 | 皮下分4点注射（总量200μl） | C57BL/6小鼠肩胛/腹股沟区，避免穿透肌肉层 | 联合PTX 0.2μg（腹腔） |
| 二次免疫 | D7同法加强 | 抗原损失率30-50%，需预过量配制 | |
| PTX强化 | D0、D48腹腔注射PTX（0.2μg） | 破坏血脑屏障，增强T细胞浸润 | 缺失则发病率↓60% |
| 观测周期 | D0-D30每日评分 | 发病峰值D12-14（尾部无力→后肢麻痹） | 死亡率＜15% |
（二）被动转移模型关键步骤
- 致敏T细胞获取：
- MOG免疫小鼠→取淋巴结细胞+MBP共培养（5天）→磁珠分选CD4⁺ T细胞
- 细胞移植：
- 静脉输入5×10⁶细胞/鼠→D10发病
- 核心优势：
- 规避抗原呈递变异，直接验证Th17/Th1致病性
（三）前沿基因编辑模型（2025）
- LAG3-KO小鼠：CD4⁺Treg糖酵解↑→Foxp3稳定性↓→EAE严重度↑2倍（揭示免疫代谢调控新靶点）
- circRERE-KO模型：环状RNA缺失→小胶质细胞活化→脱髓鞘加速
三、评价体系与病理验证
（一）神经功能评分标准（Kono量表）
| 分值 | 临床症状 | 病理对应 |
|---|---|---|
| 0 | 无症状 | 无炎性浸润 |
| 1 | 尾部张力丧失 | 脊髓血管周炎性袖套 |
| 2 | 后肢无力/步态不稳 | 小胶质细胞活化 |
| 3 | 单侧后肢瘫痪 | 灰质神经元坏死 |
| 4 | 双侧后肢瘫痪 | 白质轴突断裂 |
| 5 | 濒死状态 | 脑干广泛脱髓鞘 |
（二）组织病理学金标准
| 检测方法 | 靶点 | 阳性标志 |
|---|---|---|
| HE染色 | 炎性浸润 | 血管周“袖套样”细胞聚集（＞20个/视野） |
| LFB髓鞘染色 | 髓鞘完整性 | 白质苍白区＞30%（脊髓横切面） |
| GFAP/Iba1免疫组化 | 星形胶质/小胶质细胞活化 | GFAP⁺面积↑50%，Iba1⁺细胞＞100个/mm² |
| 电镜 | 轴突结构 | 髓鞘板层分离/线粒体肿胀 |
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