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Fluorescent Particles, Light Yellow, Low Intensity
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上海熹垣生物
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N/A
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2 mL
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文献和实验低离子强度盐水(LISS)配血法1)原理红细胞混悬于等渗盐水中,由于细胞膜上有唾液酸中的羧基离子而负电,此负电荷形成的排斥力(Zet电位)使单个红细胞之间保持一定距离。完全抗体分子大,能在红细胞之间搭桥,使细胞发生凝集。不完全抗体分子小,只能使红细胞致敏,而不出现凝集。如降低介质的离子强度,则可增加抗原抗体之间的引力(或降低Zet电位),使原来在盐水介质中不能凝集红细胞的抗体能够发生凝集,如用于间接抗人球蛋白试,可加快反应速度,缩短保温的时间。2)试剂和材料(1)0.03/LLISS于大烧杯
/ml final concentration) and run for FACS. 此3D图是我的结果。 所用细胞并非专职吞噬细胞(astrocyte)。 随处理剂量增大,可见荧光细胞的比例以及荧光强度逐渐降低。 最下面灰色的细胞群是无荧光对照。 下图是Dot plot 图形特点:感叹号 下图是专职吞噬细胞(microglia)对荧光微球的吞噬。 可见所给处理对吞噬功能无明
标记抗体包含清洗-活化-清洗-偶联-封闭-清洗-复溶保存7个步骤,其中活化、偶联和封闭是免疫标记的重要环节。以下我们会介绍微球在免疫标记中活化、偶联和封闭实验过程中的一些注意事项。 微球免疫标记抗体步骤 01. 活化 微球免疫标记常用的活化剂有EDC和NHS。EDC是极易溶于水的碳二亚胺,在酰胺合成中,用作羧基的活化试剂,使用时的PH范围一般为4.0-6.0,常和NHS连用,以提高偶联效率。在活化微球上的羧基时,微球跟活化剂的质量比,EDC跟NHS的质量比都有一个合适的比例,过少会导致活化不充分,偶联效率低
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