二硫化甲脒氯化氢

利用核苷酸交换和剪切技术进行DNA碎裂和定向进化

( 1 ) QiaexII 试剂盒（Qiagen 公司）。 ( 2 ) 乙酸缓冲液：3 mol/L 乙酸钠溶液，pH 5.3。 ( 3 ) 洗脱缓冲液：10 mmol/L Tris-氯化氢，pH 8.0。 2.5.2 通过尿素变性聚丙烯酰胺凝肢电泳纯化 ( 1 ) QiaexII 纯化：扩散缓冲液：0.5 mol/L 乙酸铵，10 mmol/L 乙酸镁，1 mmol/L EDTA，0.1% 十二烷基硫酸钠 （SDS)，pH 8.0。 ( 2 ) 提取水溶液：灭菌去离子

毕式酵母表达常见问题及解析

隆位点把质粒线性化？参考见解：其实无论是那种类型的酵母表达，转化方法基本是一制的。化学转化法对酵母转化讲就不是很高，这里你可以用电转的。查一下以前别人的讨论，看看电转化方法，效率提高了，筛选的希望就大些了由于筛选表达酵母的时间比较长，两个方案同时做应该来的及的至于线性化，对于电转是要做的步骤，这是为了后面定位重组整合。3、问：我做毕赤酵母分泌表达,想问做阴性对照的是应该用加甲醇前的上清还是用一直不加甲醇摇瓶同样时间的上清呢?参考见解：对于阴性对照我一般都用转了不含基因的原始质粒（比如９K等）的菌作为对照

毕式酵母表达常见的问题及其解析

的是裂殖酵母表达，表达载体pesp-2,酵母菌 珠sp-q01.说明只提供用化学转化法，但我转化了好几次都没有结果，是否也可以用电转化，在多克隆位点把质粒线性化? 参考见解：其实无论是那种类型的酵母表达，转化方法基本是一制的。 化学转化法对酵母转化讲就不是很高，这里你可以用电转的。查一下以前别人的讨论，看看电转化方法，效率提高了，筛选的希望就大些了 由于筛选表达酵母的时间比较长，两个方案同时做应该来的及的 至于线性化，对于电转是要做的步骤，这是为了后面