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上海维亦特生物科技有限公司
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879325-07-2
分子式:C15H12O6
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文献和实验硬蛋白之一,也含有少量的糖。是结缔组织基质的主要成份,在动物的真皮、腱、软骨中呈纤维状,集聚后构成胶原纤维。在电子显微镜下可以看到它是复杂的横纹结构(周期为64毫微米)。构成纤维的基本单位是分子量约为 30万、长度 280毫微米、宽度 1.5毫微米的原胶原蛋白( tropocollagen)。它是由富含甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸的三条多肽链向右卷曲扭成的三股螺旋状。各多肽链,大部分是由〔甘氨酸 -X-脯氨酸(或羟基脯氨酸)〕 n的氨基酸排列形成, X为任意的氨基酸残基,它们本身又是由三个氨
完整蛋白质从 SDS-PAGE 胶中的电洗脱及其 MALDI-TOF MS 分析
) 为标准 样品,发现这种方法比被动洗脱的效果好。当凝胶上样量为5jug 时,回收效率分别为: BSA 8 9 % 和 PhosB 5 8 % ^ 被 动 洗 脱 ( 将捻碎的蛋白质条带浸泡在I X 电泳缓冲液过夜) 无法回收到磷酸酶B ,并且只能回收加样的 B S A 的 39 % ( 表 27-1)。在 进 行 MALDITOF M S 之前,将浓缩蛋白质与基质共结晶,进一步去除残留杂质。混合蛋白质溶液 和基质溶液[芥子酸,l 〇 mg/m L 溶于乙腈/水 (3 : 7)],置
质芯片检测。此外,肽芯片或基于质谱的方法[ 20,21] 也可以用于这方面。 我们在此介绍基于蛋白质芯片技术的蛋白磷酸化筛选方法和高通量确定蛋白激酶底物的方法。我们已成功地用这种筛选工具鉴定大麦酪蛋白激酶 2α ( CK 2α) 和不同的拟南芥丝裂原活化蛋白(MAP) 激酶 [23] 的新靶标。我们这个方法使用本书第 28 章详细描述的植物蛋白质芯片(见第 28 章)。在放射性【 γ33 磷】三磷酸腺苷存在的条件下,用可溶和具有活性的激酶孵育芯片。通过磷屏成像仪或 X 射线胶片检测到的放射性信号,对可能
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