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文献和实验和相应检测单抗供染色与分析。由于使用了不同的检测技术得出了变异很大的计数结果,其变异率达 15-100% 。对染色方案中最具统一性的步骤是运用同型对照来去除非特异性染色。使用 FITC 标记的 CD34 抗体,克隆号为8G12 的其结果范围为 0.00-1.29% , QBEND10 抗 CD34 的抗体为 0.17-17.8% 。其中一个中心运用8G12 测不出任何阳性颗粒,五个实验室报告 QBEND10 抗体测不出任何结果。运用 PE 标记的 CD34 抗体,结果的变异性要小得多,然而根据资料
(ClassⅡ,Immunotec)和表达第3类抗原表位8G12(HPCA2,classⅢ,Becton Dickinson)的单抗进行标记,比较2组CD34+细胞百分率之间的差异。 1.5 双标记CD34/CD45 APBSC中同时加入抗CD45-FITC(J33)和抗CD34-PE(HPCA2),用溶血法处理细胞,FACS测定CD34+细胞。 1.6 统计学处理 用t检验。 2、结果 2.1 溶血法与单个核细胞标记法测得CD34+ 细胞百分率无显著性差异
的差异。1.5 双标记CD34/CD45 APBSC中同时加入抗CD45-FITC(J33)和抗CD34-PE(HPCA2),用溶血法处理细胞,FACS测定CD34+细胞。1.6 统计学处理 用t检验。2、结果2.1 溶血法与单个核细胞标记法测得CD34+ 细胞百分率无显著性差异(P>0.50)。2.2 同一样品经1%多聚甲醛固定72 h后的测定值与6 h内的测定值相比,CD34+ 细胞荧光强度降低,非特异吸附增加,变异系数范围在 9.9%~49.5%之间,平均CV值为32.2%。2.3 APBSC
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