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- 赛默飞（Thermo Fisher）
- 11-0341-85
- 2025年07月14日
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文献和实验与在各种检测方案中所应用的不同技术。并就外周血干细胞计数标准方案达成了一致。推荐方案中要求标本需预先作白细胞计数，用来染色的标本体积根据对 CD34+ 细胞数量估算来决定，分析时要求收集足够的有统计学意义的标本数量。方案中推荐使用双标记方法染色，其中包括将 2 ul 的 PE 标记的 CD3 抗体和 10ul 的 FITC 标记的 CD34 抗体（ QBEnd10 ）加入 250ul 的全血进行染色，室温下孵育 20 分钟，每 5 分钟用移液器吹打混匀一次；随后加入 Ortho 公司的红细胞裂解液孵育
(ClassⅡ，Immunotec)和表达第3类抗原表位8G12(HPCA2，classⅢ，Becton Dickinson)的单抗进行标记，比较2组CD34+细胞百分率之间的差异。 1.5 双标记CD34/CD45 APBSC中同时加入抗CD45-FITC(J33)和抗CD34-PE(HPCA2)，用溶血法处理细胞，FACS测定CD34+细胞。 1.6 统计学处理 用t检验。 2、结果 2.1 溶血法与单个核细胞标记法测得CD34+ 细胞百分率无显著性差异
的差异。1.5 双标记CD34/CD45 APBSC中同时加入抗CD45-FITC（J33）和抗CD34-PE（HPCA2），用溶血法处理细胞，FACS测定CD34+细胞。1.6 统计学处理 用t检验。2、结果2.1 溶血法与单个核细胞标记法测得CD34+ 细胞百分率无显著性差异（P＞0.50）。2.2 同一样品经1%多聚甲醛固定72 h后的测定值与6 h内的测定值相比，CD34+ 细胞荧光强度降低，非特异吸附增加，变异系数范围在 9.9%～49.5%之间，平均CV值为32.2%。2.3 APBSC
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