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文献和实验uL)至新管,加入 50 ul 7.5 M 的 NH4Ac 和 800 ul 冰乙醇(-20 °C)存放,置于冰上 15 min,使 DNA 充分沉淀,14 000×g 离心 5 min。(7)弃尽上清,置于室温晾干,加入 50~100 ul 无菌水,待 DNA 全部溶解后,加入 1 ul RNase(20 ug/ul),37 °C 孵育 1 小时,于 -20 °C 保存。(8)取 5 ul 的 gDNA 进行 1.5% 琼脂糖凝胶电泳,以鉴定其完整性,并在分光光度计测其浓度,A260/280
PCR引物设计和优化(PCR PRIMER DESIGN AND REACTION OPTIMISATION)
for calculation of the Tm isTm = 4(G + C) + 2(A + T)℃.Thus, the annealing temperature chosen for a PCR depends directly on length and composition of the primer(s)。 One should aim at using an annealing temperature (Ta) about 5℃ below the lowest Tm of ther pair
完毕取出杯子并立即加入1 ml SMMP溶液(含有亚浓度的相应抗生素)。温和地将其转移至试管(17×100 mm)中,37℃,250 rpm,复苏 1h。 2.8 查看和记录电击参数,时间常数应该在2.5 ms左右,记录场强(kV/cm)。 2.9 涂布相应的LB抗性平板,37℃培养36~48 h。 3 溶液和试剂 3.1 B2培养基:水解酪蛋白10 g,酵母粉25 g,葡萄糖5 g,NaCl 5 g,K2HPO4 1 g,加900 ml去离子水,调pH值到7.5,定容至1 l,灭菌
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









