Mouse CXCL1/KC ELISA Kit，Valuk

Mouse CXCL1/KC ELISA Kit，Valukine™

小鼠 CXCL1/KC ValukineTM ELISA 试剂盒
目录号：VAL619
适用于定量检测天然和重组小鼠 CXCL1/KC 的浓度
科研专用，不可用于临床诊断

有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效

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I. 背景
小鼠CXCL1，也被称为KC或N51，最初在成纤维细胞中被鉴定为PDGF诱导的即时
早期基因，编码约8 kDa的分泌蛋白(1-3)。小鼠CXCL1/KC蛋白序列被鉴定为炎症和免
疫调节细胞因子α(CXC)趋化因子家族的成员(4)。除了有丝分裂原刺激的成纤维细胞外，
CXCL1/KC在细菌或LPS刺激的腹腔和肺巨噬细胞、内皮细胞和血管平滑肌细胞中也能
诱导表达(5)。糖皮质激素可以抑制有丝分裂原诱导CXCL1/KC (6)。
小鼠CXCL1/KC cDNA编码一个96个氨基酸(aa)残基的前体蛋白，氨基酸末端19个
aa残基被切割生成77个aa残基的成熟的CXCL1/KC(2)。小鼠CXCL1/KC的蛋白序列与
另一个小鼠α趋化因子MIP-2的同源性约为63%。此外，CXCL1/KC的蛋白序列与人类的
GROs大约有60%的同源性(2)。与其他趋化因子一样，小鼠CXCL1/KC是一种强效中性
粒细胞引诱剂和激活剂。CXCL1/KC和MIP-2的活性被证明是由唯一的小鼠IL-8受体介
导，该受体与人IL-8 Rβ和IL-8 Rα的aa序列同源性分别为71%和68%(7, 8)。由于在小鼠
体内尚未发现IL-8同系物，提示MIP-2和CXCL1/KC是IL-8的功能同源物，可能是小鼠主
要的促炎性α-趋化因子。研究发现CXCL1/KC表达的增加与各种炎症条件下中性粒细胞
内流有关(5, 9 -11)。

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II. 概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗小鼠CXCL1/KC抗体包被于微孔板上，样品和
标准品中的小鼠CXCL1/KC会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；接着加入
生物素化的抗小鼠CXCL1/KC检测抗体进行孵育，洗涤去除未结合的物质后，加入链霉
亲和素标记的辣根过氧化物酶(Streptavidin-HRP)孵育。洗涤未结合试剂后，加入TMB
底物溶液（显色剂）。溶液颜色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；用酶标仪测定
吸光度。
B. 检测局限
 仅供科研使用，不可用于体外诊断；
 该试剂盒适用于细胞培养上清样本和小鼠血清样本；
 请在试剂盒有效期内使用；
 不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
 样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用试剂稀释液（1×）或标准品稀释液（1×）
稀释后重新检测；
 检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗
板技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。

B. 回收率
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的小鼠CXCL1/KC，测定其回收率。回收
率范围在93.2-116.1%，平均回收率在104.3%。
在小鼠血清样本中掺入检测范围内不同水平的小鼠CXCL1/KC，测定其回收率。回收率
范围在92.8-123.0%，平均回收率在102.4%。
C. 灵敏度
小鼠CXCL1/KC的最低可测剂量（MDD）一般小于0.45 pg/mL。
MDD是根据20个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对
应浓度。
D. 校正
此ELISA试剂盒经由R&D Systems生产的大肠杆菌表达的高纯度重组小鼠CXCL1/KC
蛋白所校正。

F. 样本预值
血清样本 - 使用本试剂盒检测了4份小鼠血清样本中CXCL1/KC的水平。4份样本的检
测值范围为184 - 334 pg/mL，平均值为240.3 pg/mL。
G. 特异性
将以下因子配制成50 ng/mL的浓度来检测没有观察到明显的交叉反应或干扰。
Recombinant mouse Recombinant human
MIP-1α GROα
MIP-1β GROβ
MIP-2 GROγ
大鼠CINC-1重组蛋白浓度为3125 pg/mL时检测值为1075 pg/mL（34%交叉反应）。