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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
pHelper
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
质粒干粉
别称:DB00008;
基因长:
质粒宿主:哺乳细胞,腺相关病毒
质粒用途:包装辅助
片段类型:
片段物种:
原核抗性:Amp
筛选标记:
荧光标记:
启动子:
复制子:pUC
感受态:Stbl3
温度:37度
正向引物:f1 ori-R:TGGCAAGTGTAGCGGTCAC
反向引物:Forward(left ITR):CCTCTGACTTGAGCGTCGAT
注意事项:本产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药。
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文献和实验原液感染的步骤:①将六孔板内的培养液吸出,加入上述的病毒液1.5ml。②感染后第二天,将液体吸出,换成DMEM+10%FBS;有一次感染时没有吸出原液。③感染后第二,三天,荧光显微镜下未见绿色荧光。请大家帮忙分析一下,我的问题出在哪里。丁香园网友乱爬的蚂蚁mm认为:pAAV-IRES-hrGFP、pRC、phelper应该等摩尔比例转染。丁香园网友cvn:感谢回复,按照说明书:10cm培养皿分别需要三种质粒各10μg,有此推断应当是等质量的。另外文献也是等体积做转染的。急,急,从春节到现在都是白干
3 mg/mL 体系内置优化核糖体、全套翻译因子与能量再生系统,底物氨基酸、核苷酸配比精准,普通蛋白表达量远超常规 pET 菌体诱导体系,微量反应也能收获足量蛋白用于 SDS-PAGE、活性检测。 3. 体系灵活开放,适配多元实验需求 无需繁琐菌体操作,50 μL、100 μL 微型体系即可反应,兼容离心管、96 孔板,轻松实现高通量平行筛选;支持质粒、PCR 线性产物、RCA 滚环扩增产物三类模板,无需纯化的 PCR 片段可直接上样,大幅简化模板制备流程。 二、一站式预制体系,新手也能零门槛上手
粗心人。这样的错误会给将来的克隆造成麻烦。b)如果打算PCR后直接酶切,不要忘了在酶切位点的外侧再加上保护碱基,不同的酶对于保护碱基的要求是不同的。如果不设计保护碱基,则多半要用TA克隆的方式连接到质粒上,这时要注意Taq 酶的选择。若想在目的序列上附加上并不存在的序列,如限制位点和启动子序列,可以加入到引物5'端而不影响特异性。当计算引物Tm值时并不包括这些序列,但是应该对其进行互补性和内部二级结构的检测。十、有时候,对于引物设计仅了解有限的序列信息。比如,如果仅知道氨基酸序列,可以设计兼并
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