- ￥200
- 烜雅生物
- XY-ZL0325
- 国产
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
pHelper
- 保质期：
２年
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
质粒干粉
别称：DB00008;
基因长：
质粒宿主：哺乳细胞,腺相关病毒
质粒用途：包装辅助
片段类型：
片段物种：
原核抗性：Amp
筛选标记：
荧光标记：
启动子：
复制子：pUC
感受态：Stbl3
温度：37度
正向引物：f1 ori-R：TGGCAAGTGTAGCGGTCAC
反向引物：Forward(left ITR)：CCTCTGACTTGAGCGTCGAT
注意事项：本产品仅供科研使用，不能用于临床试验，包括人体口服、注射或者体外用药。
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文献和实验原液感染的步骤：①将六孔板内的培养液吸出，加入上述的病毒液1.5ml。②感染后第二天，将液体吸出，换成DMEM+10%FBS；有一次感染时没有吸出原液。③感染后第二，三天，荧光显微镜下未见绿色荧光。请大家帮忙分析一下，我的问题出在哪里。丁香园网友乱爬的蚂蚁mm认为：pAAV-IRES-hrGFP、pRC、phelper应该等摩尔比例转染。丁香园网友cvn：感谢回复，按照说明书：１０cm培养皿分别需要三种质粒各10μg，有此推断应当是等质量的。另外文献也是等体积做转染的。急，急，从春节到现在都是白干
4. 菌种的保存、退化 一般来说是加甘油20%左右，-70保存；或制成干粉保存。但是在做甲醇酵母时发现了个问题，就是重组工程菌的退化现象比较严重，一般都是学生做得好好的，但是毕业以后下面的师弟一接手，蛋白就不表达了，或表达量非常的低。连续好几个师兄的结果都是如此，很是奇怪。我猜测可能是由于整合入基因组，毕竟是个外源的基因，不知整合到了染色体的什么部分，会不会过段时间就给“踢”下来，或就沉寂了？E.coli在复苏时都有抗性压着，酵母好像没有太合适的（不知pPICZ系列的那个抗生
粗心人。这样的错误会给将来的克隆造成麻烦。b)如果打算PCR后直接酶切，不要忘了在酶切位点的外侧再加上保护碱基，不同的酶对于保护碱基的要求是不同的。如果不设计保护碱基，则多半要用TA克隆的方式连接到质粒上，这时要注意Taq 酶的选择。若想在目的序列上附加上并不存在的序列，如限制位点和启动子序列，可以加入到引物5'端而不影响特异性。当计算引物Tm值时并不包括这些序列，但是应该对其进行互补性和内部二级结构的检测。十、有时候，对于引物设计仅了解有限的序列信息。比如，如果仅知道氨基酸序列，可以设计兼并
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