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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
180
- 英文名:
pCS2+
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
质粒干粉
别称:DB00112;
基因长:
质粒宿主:哺乳细胞,鱼类
质粒用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:空载体
原核抗性:Amp
筛选标记:
荧光标记:
启动子:CMV
复制子:pUC
感受态:DH5a
温度:37度
正向引物:SP6:ATTTAGGTGACACTATAGAA
反向引物:Forward(left ITR):CCTCTGACTTGAGCGTCGAT
注意事项:本产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药。
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文献和实验粗心人。这样的错误会给将来的克隆造成麻烦。b)如果打算PCR后直接酶切,不要忘了在酶切位点的外侧再加上保护碱基,不同的酶对于保护碱基的要求是不同的。如果不设计保护碱基,则多半要用TA克隆的方式连接到质粒上,这时要注意Taq 酶的选择。若想在目的序列上附加上并不存在的序列,如限制位点和启动子序列,可以加入到引物5'端而不影响特异性。当计算引物Tm值时并不包括这些序列,但是应该对其进行互补性和内部二级结构的检测。十、有时候,对于引物设计仅了解有限的序列信息。比如,如果仅知道氨基酸序列,可以设计兼并
预先灭菌好的10cm2平皿铺板,培养基层2-3mm,待冷却凝固后,密封倒置于4℃保存备用。 碱裂解法提取质粒所用液体 1)溶液I: 溶菌酶 4mg 去离子水 1.4ml 500mM葡萄糖 0.2ml 100mMEDTA 0.2ml 250mMTris-HCl (pH=8.0) 0.2ml 2)溶液II: 去离子水 2.4ml 10%SDS 0.3ml 2MNaOH 0.3ml 3)溶液III: 乙酸钾 29.25
1ml 75%乙醇进行洗涤,涡旋混合,7500g(2℃~8℃)离心5分钟,弃上清;6. 让沉淀的RNA在室温下自然干燥;7. 用Rnase-free water 溶解RNA沉淀。二、琼脂糖核酸电泳1. 用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净,放在制胶平板上,封闭模具边缘,架好梳子;2. 根据欲分离DNA 片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶:准确称量琼脂糖干粉,加入到配胶用的三角烧瓶内,定量加入电泳缓冲液(一般20~30 ml);3. 放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻,加入一滴荧
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