(Difluoromethyl2,2,3,3-tetrafl

金开瑞生物超滤离心管（15 mL）全新上市|蛋白浓缩· 脱盐 · 缓冲液置换，一根搞定

，枪头勿碰膜底，含沉淀先 0.22 μm 过滤，严格配平（差 ≤ 0.1 g）； 3.离心：≤ 4000 × g 离心 15–40 分钟，多数样品 20 分钟即可达标； 4.回收：立即用移液器吸出浓缩液；残留最后 50–100 μL 可加 100–200 μL 缓冲液吹打再吸，回收率提至 95% 以上； 5.换液：浓缩至原体积 1/3–1/2 → 加目标缓冲液混匀 → 再离心，重复 3 次以上置换率 > 99%。 红线：严禁超过最大安全离心力 5000 × g，离心全程必须严格配平，否则裂管、样品全

利用纳升级液相色谱- 串联质谱进行蛋白质鉴定

。 电喷雾对无机盐非常敏感，因此肽段样品上样之前必须进行脱盐处理。最有效的一种方法是使用反相高效液相色谱法（RP- HPLC) 。反相高效液相色谱法不仅可以去除盐类 ，而且还可以纯化和浓缩肽段样品。这就是为什么液相色谱- MS/MS (LC-MS/MS)是蛋白质组学中最常见的配制。由于电喷雾技术跟样品浓度高度相关，色谱柱的直径是主要参数，减少柱子的直径可以提高灵敏度 [7] 。目前用直径 50~100 μm 的纳米级色谱柱来提高质谱仪进样口的肽段浓度。此外，利用纳米级色谱柱将流量减少到 150~300

【资源】蛋白纯化经验指南（）

时你们一般用多少柱床体积？10X够了吗？ 一般也就3-5个床体积吧，离子交换需要平衡体积大点也，10X足够了 101) 有个关于胰岛素精纯化的问题想向你请教，我已取得95%纯度样品。但杂质大于1%，进一步纯化，用什么柱子，具体操作又怎样做呢，谢谢赐教。 我知道，我好象回复过，你用反相硅胶10um的柱子1.0X25cm或者2.2X25cm的柱子做制备，这样可以达到99%以上的纯度，别的方法很难做到你需要的纯度，此外胰岛素也可以用等电点沉淀的办法去掉一些杂质。 HPLC制备你可以参考