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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
1,2,3,4,6,7,8,9-D8-Dibenzothiophene
- 库存:
999
- 供应商:
智溯科ZSK
- CAS号:
labelled:33262-29-2;unlabelled:132-65-0
- 规格:
1mg///5mg///10mg
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文献和实验区部分的8个氢原子被8个氘原子取代。 这种方法的设计目的是比较一对生物样品。两个蛋白质样品(细胞状态I和细胞状态Ⅱ)分别单独用d0 ―ICAT和d8 ―ICAT试剂标记,然后混合,并用胰蛋白酶水解。然后将肽混合物送至生物素―亲和色谱柱分析。这一步骤通过分离和对含半胱氨酸残基肽的洗脱来完成对肽混合物的简化。洗脱步骤与能够进行质谱和串联质谱的仪器偶联。一对不同标记的肽几乎在相同的时间洗脱,可以通过两个距离为8kDa的质谱信号识别出来。因为预计d0 修饰的肽和d8 修饰的肽的电离性质是相同
简单介绍一下这项技术。Isotope-coded affinity tag ( ICAT) 同位素代码标记技术应用一种含与蛋白质反应基团、乙烯甘油结合区和生物素标记的试剂,这项技术目前主要由美国ABI公司推动。目前,商品化的ICAT试剂可专与蛋白质或肽段的L2半胱氨酸的巯基反应, 所带的同位素标记为含8 个氢原子的(d0) 轻试剂和8 个氘原子的( d8 ) 重试剂。一般的实验步骤是将一个蛋白质样品用轻试剂标记, 另一个样品用重试剂标记, 然后将两个样品混合, 经胰蛋白酶或Lys-C 水解蛋白得到
项技术称为同位素标记的亲和标签(isotope-coded affinitytag,ICAT),该技术是用化学试剂来修饰半胱氨酸残基的巯基基团(Gygi等,1999;Han等,2001)。这个化学试剂由三个区域组成:一个加到巯基基团上的终端碘尾巴;一个不是用d0 就是用d8 (d为氘,因而给予的两组不同标记的蛋白质在分子质量上有8Da的差别)标记的中间区域或连接区域;一个是同位素捕获的末端,这个末端包含了一个生物素钓饵。两个被标记的样品(不论是用轻试剂标记的还是用重试剂标记的)按1:1的比例混合
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