13C6-L-精氨酸盐酸盐 13C6-L-Arginine

Nat Metab：李贵登等团队合作发现肿瘤内酸度维持 T 细胞干性影响肿瘤免疫治疗

录组学、代谢组学以及同位素（13C6-葡萄糖，13C16-棕榈酸）示踪技术发现，长期胞外酸处理能够抑制 mTOR 信号通路及糖酵解途径，促进 T 细胞内的脂肪酸氧化（FAO），增强线粒体适应性, 从而维持「干性样」T 细胞的代谢表征。进一步深入分析以及通过 13C5-甲硫氨酸代谢流实验，作者们发现胞外酸度的升高显著抑制了 T 细胞内的甲硫氨酸摄入及一碳代谢（甲硫氨酸循环）。 机制上，一方面，胞外酸处理通过抑制 MYC 的表达，降低 T 细胞表面甲硫氨酸转运体（SLC7A5）的表达，进而削弱 T 细胞对胞外

​ Nature 子刊 ｜ IsoNet：基于稳定同位素示踪代谢组学技术开发的新策略

标记葡萄糖 (D-Glucose-13C6)、全碳 13 标记谷氨酰胺 (L-Glutamine-13C5)、全碳 13 标记乙酸 (Acetic acid-13C2) 、全碳 13 标记丝氨酸 (L-Serine-13C3)、全碳 13 标记半胱氨酸 (L-Cysteine-13C3)、全碳 13 标记甘氨酸 (Glycine-13C2)、全碳 13 标记的***酸钠 (Pyruvic acid-13C3 sodium) 等。 这些全碳 13 标记化合物，覆盖了糖酵解、TCA 循环、氨基酸代谢

包涵体提出、纯化、复性必胜技

将包涵体悬浮在下述溶液中，4℃振荡过夜。 100mM Tris 50mM Glycine 8.5M 尿素 溶液用HCl调节到pH 8.0后加入 25mM DTT 6000RPM离心，取上清，去除不溶解物。 包涵体蛋白的复性 将溶解的包涵体装入透析袋，在4℃下将透析袋浸入下列溶液依次透析： 0.1M Tris 0.4M L-Arginine 1 mM EDTA 0.2mM PMSF 4M 尿素 溶液pH调节到8.0 透析24小时 0.1M Tris