单侧输尿管梗阻大小鼠模型构建

一、实验动物选择

参数	大鼠（Rat）	小鼠（Mouse）
品系	SD/Wistar	C57BL/6, BALB/c
年龄	6-8周龄	8-12周龄
体重	150-250g	20-30g
性别	雄性（雌性受雌激素影响）	雄性（推荐）

二、手术器械与试剂

1. 手术器械

• 显微手术器械（精细镊子、剪刀、持针器）
• 5-0或6-0丝线（大鼠） / 7-0或8-0丝线（小鼠）
• 手术显微镜（小鼠推荐使用）
• 加热垫（维持体温）
• 无菌纱布、棉签

2. 麻醉与消毒

• 麻醉：
  • 大鼠：2%戊巴bi妥钠（40-50 mg/kg 腹腔注射）或异氟烷（3%诱导，1.5%维持）。
  • 小鼠：异氟烷（推荐，可控性强）或水合氯醛（10% 0.3 mL/100g）。
• 消毒：碘伏 + 75%酒精。

3. 术后护理

• 生理盐水（1-2 mL 皮下注射，防止脱水）
• 抗生素（青霉素 5万单位/kg，连续3天）
• 镇痛药（布洛芬 5 mg/kg，术后24h内）

三、手术步骤（以小鼠为例，大鼠类似）

1. 术前准备

• 禁食4-6h（不禁水）。
• 麻醉后，俯卧或侧卧位固定，腹部剃毛消毒。

2. 手术切口

• 大鼠：左侧腹斜切口（1.5-2cm）或中线切口。
• 小鼠：左侧背部切口（1cm），避免损伤腹腔脏器。

3. 输尿管暴露

• 钝性分离肌肉层，轻轻推开肠管，找到左侧输尿管（位于肾下极）。
• 注意：
  • 避免牵拉输尿管导致缺血。
  • 小鼠输尿管极细，需在显微镜下操作。

4. 输尿管结扎

• 完全梗阻（常用）：
  1. 用7-0丝线在输尿管近端（距肾门0.3-0.5cm）双重结扎。
  2. 在两结扎点间剪断输尿管（确保完全梗阻）。
• 部分梗阻（可选）：

• • 用细针头扩张输尿管后结扎（模拟不完全梗阻）。

5. 关腹

• 逐层缝合肌肉和皮肤（5-0或6-0可吸收线）。
• 小鼠皮肤可用组织胶（如Vetbond）粘合。

四、模型验证

1. 术后观察

• 存活率：大鼠>90%，小鼠>85%（操作熟练情况下）。
• 术后并发症：
  • 感染（严格无菌操作）。
  • 输尿管误伤（轻柔操作）。
  • 梗阻不完全（剪断输尿管可避免）。

2. 样本收集

• 时间点：
  • 早期（3-7天）：炎症反应。
  • 中期（7-14天）：肾小管萎缩。
  • 晚期（14-21天）：明显纤维化。
• 检测方法：
  • 组织学：HE染色（炎症）、Masson/PAS染色（纤维化）。
  • 分子生物学：qPCR/WB检测α-SMA、TGF-β、Collagen I/III。
  • 影像学：超声观察肾积水（术后3天可见）。

五、注意事项

1. 对照组设置：
   • 假手术组（仅暴露输尿管不结扎）。
   • 对侧肾脏（可作为内参，但可能有代偿性增生）。
2. 小鼠 vs 大鼠：
   • 小鼠输尿管更细，需更高手术技巧。
   • 大鼠模型更稳定，适合长期研究（>14天）。
3. 伦理与动物福利：
   • 使用镇痛药（如布洛芬）。
   • 术后单笼饲养，避免打架。