大肠杆菌DH10B感受态

中文名称：大肠杆菌DH10B感受态

英文名称：DH10B Chemically Competent Cell

形式：冻存管

培养基：酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，氯化钠：10.0，琼脂：15.0，pH：7.0±0.2（25℃）

生长条件：37℃；18-24h；好氧

存储条件：-80℃

安全等级：0

操作步骤：
1.大肠杆菌DH10B感受态细胞放置冰中融化 (或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅 速插入冰中) ，加入目的 DNA (质粒或连接产物) 并用手拨打 EP 管底轻轻混匀，冰上静置 25 分钟。
2.42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基LB，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上。
​​​​​​​5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少17h。