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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
205
- 英文名:
BL21(DE3) Chemically Competent Cell
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
冻存管
英文名称:BL21(DE3) Chemically Competent Cell
形式:冻存管
培养基:酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,氯化钠:10.0,琼脂:15.0,pH:7.0±0.2(25℃)
生长条件:37℃;18-24h;好氧;
存储条件:-80℃
安全等级:1
操作步骤:
1.感受态细胞放置冰中融化 (或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅 速插入冰中) ,加入目的 DNA (质粒或连接产物) 并用手拨打 EP 管底轻轻混匀,冰上静置 25 分钟。
2.42℃水浴热激 45 秒,迅速放回冰上并静置 2 分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基LB,混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少17h。
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文献和实验(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1 2:BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。 基因型:F-,ompT, hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3
【交流】转载:JM109,DH5a,BL21这些感受态有何区别
1:DH5a菌株 DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。 基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1 2:BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动
(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1 2:BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。 基因型:F-,ompT, hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3
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