- ￥500 - 5000
- 英诺思生物
- SN3401
- 中国
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
详询
- 英文名：
Human Monocyte Sorting Kit
- CAS号：
详询
- 保质期：
详询
- 供应商：
北京百奥创新科技有限公司
- 保存条件：
运输条件： 4°C运输
一、试剂盒组分
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产品名称 |
存储条件 |
缓冲液成分 |
功能 |
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EasyIso TM Human FcR Blocker |
4°C保存，避免冷冻 |
PBS, 0.1% BSA |
封闭FcR受体，降低抗体非特异性结合 |
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EasyIso TM Human Monocyte Isolation Cocktail |
4°C保存，避免冷冻 |
PBS, 0.1% BSA |
识别非单核细胞抗体混合液，标记非目的细胞 |
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EasyIso TM Streptavidin Nanobeads |
4°C保存，避免冷冻 |
PBS, 0.1% BSA |
磁珠结合非单核细胞，通过磁极去除 |
BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline 运输条件： 4°C运输
二、设备和试剂要求
. 缓冲液：FACS Buffer (1 x PBS+0.02% EDTA+2% FBS)
. 耗材：70 μm无菌尼龙滤网；无菌离心管
. 仪器：离心机 ，磁力架
三、温馨提示
. 请采用预冷的FACS buffer进行细胞分选
. 推荐采用淋巴细胞分离液进行密度梯度离心分离PBMC，不建议采用红细胞裂解液
. 采用FACS Buffer而不是PBS进行操作 ，能够提高细胞得率
. 确保FACS Buffer渗透压稳定，免疫细胞较为敏感
. 确保每一步无菌操作，谨防污染
四、操作步骤
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步骤 |
说明 |
剂量和时间 |
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1 |
准备PBMC单细胞悬液至指定浓度 |
1 x 10^8 cells/mL |
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2 |
加入EasyIso TM Human FcR Blocker至样品中 |
100 μL/mL |
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3 |
加入EasyIso TM Human Mococyte Isolation Cocktail至样品中 |
100 μL/mL |
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4 |
抗体和细胞孵育 |
4℃孵育15 min |
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5 |
震荡混匀 Streptavidin Nanobeads |
混匀30 s |
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6 |
加Streptavidin Nanobeads至样品中 |
100 μL/mL |
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7 |
轻柔混匀磁珠和细胞，孵育 |
4℃孵育15 min |
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8 |
加入FACS Buffer到样品中，轻轻混匀 |
总体积加入至2.5 mL （ 5 mL流式管） 总体积加入至 7.5 mL (15 mL离心管) |
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9 |
样品置于磁力架上 ，使磁珠吸附 |
单孔磁力架吸附（ 3 min） 联排磁力架吸附（ 5 min） |
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10 |
倾斜磁力架，将样品倒入新的收集管中，收集样品 |
细胞分离成功 |
如图：采用Immuno-X系列产品（#SN3401）分离PBMC中的单核细胞。（A）分选前，单核细胞比例约占PBMC细胞的16.9% ，采用 （#SN3401）分离健康人PBMC中单核细胞，采用CD11b和CD14的流式抗体进行染色 ，分选后的单核细胞纯度高达90.7%。
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文献和实验分离后细胞的功能研究
Kim, K. D., et al. (2012).
Optimized protocols for isolation and analysis of mouse CD4⁺ T cells.
*Journal of Immunological Methods, 384(1-2), 1-8.*
DOI: 10.1016/j.jim.2012.06.008
感染或免疫模型中的应用
Swain, S. L., et al. (2008).
*CD4⁺ T cell memory: Generation and multi-faceted roles for CD4⁺ T cells in protective immunity to influenza.*
*Immunological Reviews, 211(1), 8-22.*
DOI: 10.1111/j.0105-2896.2006.00388.x
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