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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
武汉赛奥斯生物科技有限公司
- 库存:
999
- 生长状态:
悬浮生长
- 运输方式:
常温/干冰
- 细胞形态:
淋巴母细胞
- 物种来源:
小鼠
- 规格:
1×10⁶cells
C1498 小鼠白血病细胞
产品编号:CL-191m
细胞特性
形态:淋巴母细胞,悬浮生长
含量:>1x106cells
规格:T25瓶x1(常温运输)/ 2mL冻存管x2(干冰运输)
用途:仅供科研使用
培养基及培养冻存条件准备
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完全培养基 |
90%1640 + 10%FBS |
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培养条件 |
37℃,5%CO2 |
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冻存液 |
50%基础培养基 + 40%FBS + 10%DMSO |
收货须知
收货当天发现异常,请在24小时内及时联系客服,逾期视为收货良好!
冻存管形式:收货后及时置于-80℃冰箱保存,若长时间不使用,应过夜转移至液氮。
T25形式:收货后于培养箱中静置2-3h,再对细胞进行常规操作。在无菌条件下,将原瓶培养液转移到离心管中,1000-1200rpm/min离心5~10min后重悬细胞,转移悬浮细胞到新的T25瓶中,补加完全培养基到10mL,放入培养箱中培养。请严格按照本说明操作,否则造成细胞失活等情形,不予提供补发服务。
细胞复苏、传代、冻存操作
(一)细胞复苏
① 冻存管从液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中,迅速没入 37℃水浴锅,摇晃冻存管加速溶解,以 1 min内全部溶解为宜;
② 在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL完全培养基的离心管内,1000-1200rpm/min 离心 5 分钟,弃去上清液,用 1-2mL 完全培养基重悬细胞;
③ 然后将细胞悬液加入到含有6-8mL完全培养基的T25瓶中,放入培养箱中竖立培养。
(二)细胞传代
① 离心法:收集细胞,1000rpm条件下离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2 的比例分到新的含8mL培养基的T25瓶中。
② 半量换液法:培养瓶静置5-10分钟后,将上清培养基轻轻吸走一半,剩余留有细胞沉淀的培养基重悬混匀,细胞悬液按1:2的比例分到新的含8mL培养基的T25瓶中。
③ 注意培养基pH值变化和细胞密度,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到大于2×106个/mL时,重复传代操作或者冻存。
注意事项:
① 细胞具有密度依赖性,首次传代(密度达到 80%),建议 1:2 传代(保持细胞密度),且优先在 T25 瓶中。
② 密封培养瓶的话,处理完后放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松。
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